食品中亚硝酸盐含量测定试剂盒

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价格:380

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产品信息

 

产品名称

测定方法

产品编号

规格

食品中亚硝酸盐含量测定试剂盒

微量法

HRK0626

100管/96样

正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

 

测定意义

 

在食品中,亚硝酸盐可与肉品中的肌红素结合而更安定,在食品加工业中作为保色剂,以维持肉制品的良好外观,并防止肉毒梭状芽孢杆菌的产生,提高食用肉制品的安全,但是人体长期摄入亚硝酸盐过量的食品,可诱发消化系统癌变。

 

测定原理

 

在酸性条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸反应生成重氮化合物,再与N-1-萘基乙二胺形成紫红色偶氮化合物,在540nm处有特征吸收峰。

 

自备实验用品及仪器

 

天平、研钵或匀浆器、水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。

 

试剂组成和配制

 

提取液一:液体50 mL×1瓶,室温保存。

提取液二:液体50 mL×1瓶,室温保存。

提取液三:液体50 mL×1瓶,室温保存。

粉剂四:粉剂 100 mg ×1支,室温保存。

试剂一:液体10mL×1瓶,4℃避光保存。

试剂二:液体10mL×1瓶,4℃避光保存。

 

样品处理

 

称取样品约0.2g鲜重或0.05g干重,破碎,加入0.5 mL 提取液一,沸水浴15min,冷却至室温,加入0.5 mL提取液二,震荡摇匀,加0.5 mL 提取液三,用镊子加少量粉剂四(约1 mg),静置30min,25℃,8000g离心15 min,取上清液待测。

 

测定步骤和操作表

 

1.分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长至540nm,蒸馏水调零。

2.操作表

 

测定管

空白管

蒸馏水(µL)

 

70

样品(µL)

70

 

试剂一(µL)

65

65

试剂二(µL)

65

65

混匀,25℃静置15min,于微量石英比色皿/96孔板中检测540nm处吸光值A。   

 △A=A测定 - A空白

注意:空白管只需测定一次。

 

亚硝酸盐含量计算

 

a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准曲线回归方程为:y=0.234x + 0.0002,R2= 0. 999  x为标准品亚硝酸钠浓度(μg/ml) y为吸光值A。

NO2-(μg/g)=(△A-0.0002)÷0.234×V样÷(V样÷V样总×W)×0.6668=(A – 0.086)÷0.234×1.5×0.6668÷W=4.27×(△A-0.0002)÷W

V样总:加入提取液体积,1.5 mL; V样:反应中样品体积,0.07mL;W:样品质量,g。

b.用96孔板测定的计算公式如下

标准曲线回归方程为:y=0.141x +0.095,R2= 0. 9991  x为标准品亚硝酸钠浓度(μg/ml) y为吸光值A。 

NO2-(μg/g )=(△A-0.0002)÷0.141×V样÷(V样÷V样总×W)×0.6668=(△A-0.0002)÷0.141×1.5×0.6668÷W=7.09×(△A-0.0002)÷W

V样总:加入提取液体积,1.5 mL; V样:反应中样品体积,0.07mL;W:样品质量,g。

 

注意事项

 

1.试剂盒2-8℃保存。

2.试剂对人体有一定的危害,请穿实验服,戴手套操作。

3.若检测出得OD值在标准曲线范围外,请将样品进行适当的浓缩或稀释(A540 <0.09浓缩,A540 > 1.5 适当稀释)。

4.最低检出限为5μg/g。

5.本产品仅作科研用途!

 

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