SP Herose 6 Fast Flow SP强阳离子交换琼脂糖凝胶介质6 FF

SP Herose 6 Fast Flow SP强阳离子交换琼脂糖凝胶介质6 FF

价格:420

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产品信息

 

产品名称      

产品编号

规格

储存

价格(元)

SP Herose 6 Fast Flow SP强阳离子交换琼脂糖凝胶介质6 FF

HRD0168

25 mL

4℃

420.00

SP Herose 6 Fast Flow SP强阳离子交换琼脂糖凝胶介质6 FF

HRD0169

100 mL

4℃

1580.00

 

产品描述

 

      离子交换树脂主要包括强酸性阳离子交换树脂、弱酸性阳离子交换树脂、强碱性阴离子交换树脂和弱碱性阴离子交换树脂4种,广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的分离纯化。

      本品SP强阳离子交换树脂以高度交联的6%琼脂糖为介质,小颗粒设计,高分辨率,多应用样品的精细纯化。本品带电基团-SO3

 

产品性质

 

指标名称

指标参数

外观

乳白色半透明球状颗粒

基质(Matrix)

6%交联琼脂糖

粒径(Bead size)

25-45 µm

配基

-O-CH2CHOHCH2OCH2CH2CH2SO3-

离子交换类型

强酸阳离子基团,可交换离子H+

总离子交换容量

0.18-0.25(mmol/mL)

动态载量

>130mg 溶菌酶/mL

载量

0.15-0.20mmol H+/mL 介质

运行流速

20-40(0.01Mpa/cm柱高, cm/h)

工作温度

4-40℃

pH工作范围

2-12

pH稳定性

4-13(长时间)/ 3-14(短时间)

化学稳定范围

常用的水相缓冲液;1mol/L氢氧化钠;8mol/L尿素;6mol/L盐酸胍;70%乙醇

耐热

120℃(pH7水中,30min)

耐压

0.05(MPa/cm高)

储存缓冲液

20%乙醇

 

运输和保存方法

 

冰袋运输。2-8℃保存,有效期5年。

 

使用方法

 

1 缓冲液的准备

所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤。

2 样品准备

样品在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。

3 样品纯化

1)将介质装入合适的层析柱,层析用5倍柱体积的结合Buffer进行平衡,使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下,起到保护蛋白的作用。

2)将样品加到平衡好的 SP Herose 6 Fast Flow 中(保证目的蛋白与填料充分接触,提高目的蛋白的回收率),收集流出液。

3)用10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗,去除非特异性吸附的杂蛋白,收集洗杂液。

4)使用5-10倍柱体积的洗脱Buffer,收集洗脱液,即目的蛋白组分。

5)依次使用3倍柱体积的结合Buffer和5倍柱体积的去离子水平衡填料,最后再用5倍柱体积的20%的乙醇平衡,然后保存在等体积的20%的乙醇中,置于4℃保存,防止填料被细菌污染。

4 填料清洗

离子交换树脂每次使用后可以用1M NaCl 甚至更高离子强度溶液或高pH溶液清洗,然后用至少5倍柱体积的Buffer 进行平衡至离子强度或pH值稳定。

CIP(Cleaning In Place)清洗

离子交换树脂可以重复使用而无需再生,但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,这时可按照下面方法对树脂进行清洗。

1)去除一些沉淀或变性物质

用2倍柱体积的1M NaOH 溶液进行清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

2)去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质

用3-4倍柱体积的70%乙醇或3-4倍柱体积的1% Triton X-100 清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。

3)去除一些离子键结合物质

用3-4倍柱体积的2M NaCl清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH 7.4清洗。

注意事项

1)请勿冷冻保存本产品。

2)填料使用前一定要充分颠倒数干次,使填料混合均匀。

3)所有操作过程中,样本需要在4℃或冰上操作。

4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

5)本产品仅作科研用途!

 

附表 问题及解决方案

 

问题

可能原因

推荐解决方案

柱子反压过高

填料被堵塞

按照【填料清洗】部分对树脂进行清洗。

样品中含有微小的固体颗粒,建议使用前用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤。

洗脱样品较杂

树脂重复多次使用

按照【填料清洗】部分对树脂进行清洗或更换新树脂。

平衡不充分

增加平衡液体积,确保树脂充分平衡/洗杂。

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