价格:420
货号SP Herose 6 Fast Flow SP强阳离子交换琼脂糖凝胶介质6 FF
产品详情
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产品信息
产品名称 |
产品编号 |
规格 |
储存 |
价格(元) |
SP Herose 6 Fast Flow SP强阳离子交换琼脂糖凝胶介质6 FF |
HRD0168 |
25 mL |
4℃ |
420.00 |
SP Herose 6 Fast Flow SP强阳离子交换琼脂糖凝胶介质6 FF |
HRD0169 |
100 mL |
4℃ |
1580.00 |
产品描述
离子交换树脂主要包括强酸性阳离子交换树脂、弱酸性阳离子交换树脂、强碱性阴离子交换树脂和弱碱性阴离子交换树脂4种,广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的分离纯化。
本品SP强阳离子交换树脂以高度交联的6%琼脂糖为介质,小颗粒设计,高分辨率,多应用样品的精细纯化。本品带电基团-SO3–。
产品性质
指标名称 |
指标参数 |
外观 |
乳白色半透明球状颗粒 |
基质(Matrix) |
6%交联琼脂糖 |
粒径(Bead size) |
25-45 µm |
配基 |
-O-CH2CHOHCH2OCH2CH2CH2SO3- |
离子交换类型 |
强酸阳离子基团,可交换离子H+ |
总离子交换容量 |
0.18-0.25(mmol/mL) |
动态载量 |
>130mg 溶菌酶/mL |
载量 |
0.15-0.20mmol H+/mL 介质 |
运行流速 |
20-40(0.01Mpa/cm柱高, cm/h) |
工作温度 |
4-40℃ |
pH工作范围 |
2-12 |
pH稳定性 |
4-13(长时间)/ 3-14(短时间) |
化学稳定范围 |
常用的水相缓冲液;1mol/L氢氧化钠;8mol/L尿素;6mol/L盐酸胍;70%乙醇 |
耐热 |
120℃(pH7水中,30min) |
耐压 |
0.05(MPa/cm柱高) |
储存缓冲液 |
20%乙醇 |
运输和保存方法
冰袋运输。2-8℃保存,有效期5年。
使用方法
1 缓冲液的准备
所用水和Buffer在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤。
2 样品准备
样品在使用前最好用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。
3 样品纯化
1)将介质装入合适的层析柱,层析用5倍柱体积的结合Buffer进行平衡,使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下,起到保护蛋白的作用。
2)将样品加到平衡好的 SP Herose 6 Fast Flow 中(保证目的蛋白与填料充分接触,提高目的蛋白的回收率),收集流出液。
3)用10-15倍柱体积的洗杂Buffer进行清洗,去除非特异性吸附的杂蛋白,收集洗杂液。
4)使用5-10倍柱体积的洗脱Buffer,收集洗脱液,即目的蛋白组分。
5)依次使用3倍柱体积的结合Buffer和5倍柱体积的去离子水平衡填料,最后再用5倍柱体积的20%的乙醇平衡,然后保存在等体积的20%的乙醇中,置于4℃保存,防止填料被细菌污染。
4 填料清洗
离子交换树脂每次使用后可以用1M NaCl 甚至更高离子强度溶液或高pH溶液清洗,然后用至少5倍柱体积的Buffer 进行平衡至离子强度或pH值稳定。
CIP(Cleaning In Place)清洗
离子交换树脂可以重复使用而无需再生,但随着非特异性结合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和结合载量都下降,这时可按照下面方法对树脂进行清洗。
1)去除一些沉淀或变性物质
用2倍柱体积的1M NaOH 溶液进行清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。
2)去除一些疏水性吸附造成的非特异性吸附物质
用3-4倍柱体积的70%乙醇或3-4倍柱体积的1% Triton X-100 清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH7.4清洗。
3)去除一些离子键结合物质
用3-4倍柱体积的2M NaCl清洗,然后立即用5倍柱体积的PBS, pH 7.4清洗。
注意事项
1)请勿冷冻保存本产品。
2)填料使用前一定要充分颠倒数干次,使填料混合均匀。
3)所有操作过程中,样本需要在4℃或冰上操作。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
5)本产品仅作科研用途!
附表 问题及解决方案
问题 |
可能原因 |
推荐解决方案 |
柱子反压过高 |
填料被堵塞 |
按照【填料清洗】部分对树脂进行清洗。 |
样品中含有微小的固体颗粒,建议使用前用0.22 µm或0.45 µm滤膜过滤。 |
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洗脱样品较杂 |
树脂重复多次使用 |
按照【填料清洗】部分对树脂进行清洗或更换新树脂。 |
平衡不充分 |
增加平衡液体积,确保树脂充分平衡/洗杂。 |