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产品信息 

正式测定前取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义

      生物碱存在于自然界（主要为植物，但有的也存在于动物）中的一类含氮的碱性有机化合物， 大多数有复杂的环状结构，氮素多包含在环内，有显著的生物活性，是中草药中重要的有效成分之一。

测定原理

生物碱与溴甲酚绿指示剂反应，生成绿色化合物，在416nm处有最大吸收峰。

需自备的仪器和用品

分光光度计、水浴锅、超声波清洗器、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、80%乙醇、氯仿和蒸馏水。

试剂的组成和配制

试剂一：液体10mL×1瓶，4℃保存；

试剂二：液体50mL×1瓶，4℃保存；

试剂三：液体 20mL×1瓶，4℃避光保存；

生物碱的提取

     样本烘干粉碎，过80目筛。称取约0.1g样本，加入0.1mL试剂一，再加入0.9,mL 80%乙醇， 充分混匀后转移到EP管中，超声波提取60min，8000 g，25℃离心10min，取上清液待测。另取空EP管，加入0.1mL试剂一和0.9mL的80%乙醇，混匀后作为空白液。

测定步骤

1、分光光度计预热30min以上，调节波长至416nm处。

2、操作表：在EP管中加入如下试剂

剧烈振荡混匀，室温静置 40min，吸取下层氯仿层1mL于1mL玻璃比色皿，416nm处读取吸光值A，ΔA=A 测定-A空白，空白管只要做一管。

生物碱含量计算

标准条件下测定的回归方程为 y = 3.83x - 0.0005，R² = 0.9942；x为标准品浓度（mg/mL），y 为 ΔA。

生物碱含量(mg/g 干重)=(ΔA+0.0005)÷3.83×V 样总÷W= 0.261×(ΔA+0.0005) ÷W

V 样总：加入提取液体积，1mL；W：样本鲜重，g。

注：本产品仅作科研用途！