产品信息

产品描述

      基于珠和柱的分离方法依赖于亲和结合系统的速度和易用性。配体，如链霉亲和素、抗体和凝集素，既可用于捕获特异性标记的靶点，也可用于分离自然表达配体结合伙伴的细胞和生物分子。植物凝集素（如刀豆球蛋白A（ConA））独特的糖结合特性使其可用于标记和分离血清和细胞裂解液中的聚糖呈递细胞和糖蛋白。凝集素还被用于细胞粘附研究，影响淋巴细胞活化，并探索基于碳水化合物的疗法。刀豆蛋白A磁珠也被用于切割和运行，这是一种染色质分析协议，与芯片相比有几个关键优势。

储存条件

在4^oC下储存2年。

使用说明

所需材料

1.5mL或2mL微量离心管

哺乳动物细胞（10000-100000细胞）

绑定缓冲区：1x PBS+1mM MgCl2+1mM MnCl2+

1mM CaCl2（pH7.4）

洗涤缓冲液：1x PBS+1mM MgCl2+1mM MnCl2+1mM CaCl2（pH值7.4）+0.1%吐温®20

洗脱缓冲液；5mmTris（pH值8.0）+0.15M NaCl+0.05%SDS+1mg葡萄糖

细胞的制备

1.制备哺乳动物细胞（10000-100000个细胞）样品，在室温下以600 x g离心3-5分钟。，小心地除去上清液

2.向试管中加入90ul的BindingBuffer，混合试管以重新使用试管。离心法在室温下吃600 x g 3-5分钟，小心地除去上清液

3.向细胞中添加90μL洗脱缓冲液，并小心地重新悬浮。

磁珠的制备

4.将10uL Con A磁珠转移至干净的微量离心管中。将试管放在磁铁上，将珠子从溶液中分离出来。小心地取出并丢弃溶液。

5.通过添加200μL的结合缓冲液清洗珠子。拌匀。

6.再重复一次粒子灰。最后一次清洗后，去除上清液。

7.将步骤3中的细胞样品添加到珠中，并通过反转充分混合，以重新悬浮珠。

8.将样品置于试管旋转器上，并在室温下混合10-30分钟。

9.从旋转器中取出样品，并将其放置在磁性分离器中。小心地除去清除的上清液。

10.通过添加0.5mL洗涤缓冲液来洗涤珠子。通过反转或旋涡混合充分混合。

11.重复步骤9-10。用0重新使用珠子。5mL洗涤缓冲液，放在试管旋转器上5分钟。

12.重复步骤9-10。

13.更换磁性分离器上的磁珠管，并小心移除/丢弃上清液。

14.向微珠中添加50-250μL的溶解缓冲液。混合试管以重新悬浮珠子，并在室温下将试管置于旋转器上10-30分钟。

15.更换磁性分离器上的磁珠管，小心地去除洗脱液并转移到干净的微离心管中，以备日后使用或储存。

16.重复步骤14-15。洗脱液可以汇集并沉淀。将洗脱液储存在冰上以便立即使用，或冷冻以便长期储存。

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2）本产品仅作科研用途！