• 说明书丨HRJ00281-酵母缺陷型培养基-Leu-Ura-Ade.pdf

产品信息

产品描述

      二代酵母选择培养基是荷瑞生物特色产品，它采用专利技术对培养基成分进行营养增强和缺陷配对组合双处理，不仅极大地方便了配制和使用，达到速成型和即配型的实验操作效益，更重要的是我们的二代培养基的适用性更为广泛，它适用于一切基因型酵母，对于那些生长缓慢和色素敏感型酵母的优势尤为突出，这些独特优势是第一代培养基和其它公司的类二代培养基无法比拟的。营养增强和缺陷组合配对双处理培养基是酵母遗传学研究的首选，也是酵母双杂交和单杂交实验用培养基的最理想选择。

实验步骤

酵母培养基配制方法：

1. 液体培养基：

      8g粉状选择培养基加950 ml 水,常规高压灭菌后再加50ml 40%过滤除菌的无菌葡萄糖。（备注： YPD、YPDA和YPD plus这三种系列不需要再加糖，直接按瓶子上标签指示加水配制即可）。配制液体培养基不需要调pH，因为酵母偏好酸性条件生长。如果为了实验方便，葡萄糖也可按2%的量以粉末的形式加进去高压灭菌（见下面标准配制法注解）。

2. 固体培养基：

      8g粉状培养基加950 ml, 用NaOH调pH至大致范围5.8-6.5, 然后按20g/L加琼脂粉, 高压灭菌后再加预温的50ml 40%无菌葡萄糖, 摇匀后倾倒平皿(备注:如不调pH, 琼脂在酸性条件下会产生崩解)。如果为了实验方便，葡萄糖也可按2%的量以粉末的形式加进去高压灭菌。

3. 标准配制法：

      标准流程要求葡萄糖过滤除菌，因为葡萄糖与培养基中的氨基酸在高温高压下发生化学反应。但有些实验者为方便起见，将固体葡萄糖按2% 的量(按每升20克)直接加到培养基后一起高压灭菌，虽然酵母也可以生长，但一般不推荐这种将葡萄糖高压灭菌的方法。如果实在要图省事想用这种方法，那么一定要控制好高压时间在18-20分钟结束，待压力下降和温度降到安全范围后应尽快取出。否则液体颜色会变成黄色而对酵母特性发生不可预知的影响。但半乳糖和棉子糖不能高压灭菌，只能用过滤除菌制备，建议制备高浓度40%的储存液，按计算好的体积加到高压灭菌的培养基使得终浓度为2%。40％无菌棉子糖和半乳糖可以直接选购我司成品；如客户自行配制高浓度半乳糖时发现很难溶解，可联系售后做技术支持。

举例

      如配制1L培养基则称取8克培养基加水950 mL，常规高压灭菌（121℃，20min）完成后待温度降至安全范围70℃时趁热立刻加入50ml 40%过滤除菌的无菌糖，充分混匀。

酵母转化即用储存液 (Stock Solutions):

注:

1. 50% PEG不要高压灭菌（高压导致PEG分子断裂）, 应过滤除菌, 否则会影响转化效率

2. 50% PEG很难过滤, 建议使用本公司即用型储液(货号:HRJ02091)

注意事项

1）用于组成型表达（如酵母双杂交、酵母单杂交）以及其它采用组成型启动子的实验一般都加葡萄糖；

2）诱导型表达如采用GAL1启动子载体的表达一般都加半乳糖和棉子糖；

3）葡萄糖可以勉强高压灭菌，但半乳糖和棉子糖是绝对不能高压灭菌的, 应采用无菌过滤法先制备40%的无菌储备液，待不含糖的培养基高压灭菌后按最终应用浓度为2％ 的量计算需要加入的无菌液体糖储存液；

4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

5）本产品仅作科研用途！

运输与保存方式

常温运输。常温保存，有效期2年。