果糖(fructose ,FT)含量试剂盒

果糖(fructose ,FT)含量试剂盒

价格:280

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产品信息

 

产品名称

测定方法

产品编号

规格

果糖(FT)含量试剂盒

分光光度法

HRK1513

50管/48样

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

 

测定意义

 

果糖是一种最为常见的己酮糖,是葡萄糖的同分异构体,以游离状态大量存在于水果的浆汁和蜂蜜中,能与葡萄糖结合生成蔗糖。果糖是最甜的单糖,广泛应用于食品、医药、保健品生产中。

 

测定原理

 

果糖与间苯二酚反应,生成有色物质,在480nm下有特征吸收峰。

 

所需的仪器和用品

 

可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、蒸馏水

 

试剂的组成和配制

 

提取液:液体 100ml×1瓶,4℃保存;

试剂一:1mg/mL标准液10mL×1瓶,4℃保存;

试剂二:液体 40ml×1瓶,4℃保存;

试剂三:液体 15ml×1瓶,4℃避光保存;

试剂四:粉剂0.5g×1瓶,常温保存。

 

果糖提取

 

称取0.1~0.2g样本,常温研碎;加入1mL提取液,适当研磨后快速转移到有盖离心管中;置于80℃水浴锅中10min(盖紧,以防止水分散失),振荡3~5次,冷却后,4000g,25℃离心10min,取上清;加入少量(约2mg)试剂四,80℃脱色30min(盖紧,以防止水分散失);再加入1mL提取液,4000g,25℃离心10min,取上清液测定。

 

测定步骤

 

分光光度计预热30min以上,调节波长至480nm,蒸馏水调零。

样本测定(在5mL EP管中依次加入下列试剂):

试剂(μL)

空白管

标准管

测定管

样本

 

 

100

试剂一

 

100

 

蒸馏水

100

 

 

试剂二

700

700

700

试剂三

200

200

200

混匀,95℃水浴反应30min(盖紧,以防止水分散失),冷却后测定480nm处光吸收值,空白管、标准管和测定管分别记为A1、A2和A3。

 

果糖含量计算

 

1、果糖含量(mg/mg prot)=(C标准管×V1)×(A3-A1)÷(A2-A1) ÷(V1×Cpr)= (A3-A1)÷(A2-A1) ÷Cpr

此法需要自行测定蛋白浓度。

2、果糖含量(mg/g鲜重)=(C标准管×V1)×(A3-A1) ÷(A2-A1) ÷(W×V1÷V2)= 2× (A3-A1) ÷(A2-A1) ÷W。

C标准管:标准管浓度,1mg/mL;V1:加入样本体积,0.1mL;V2:加入提取液体积,2mL; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本鲜重,g。

注意:最低检测限为100ng/g鲜重或1ng/mg prot

注意事项

本产品仅作科研用途!

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