价格:1,100
货号土壤纤维素酶(Solid-cellulase,S-CL)活性测定试剂盒
产品详情
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产品信息
产品名称 |
测定方法 |
产品编号 |
规格 |
土壤纤维素酶(S-CL)活性测定试剂盒 |
微量法 |
HRK19010 |
100管/48样 |
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义
s-CL主要来源于土壤微生物,S-CL催化农作物秸秆产生的葡萄糖是主要的碳源营养物质。
测定原理
采用蒽酮比色法测定S-CL催化纤维素降解产生的还原糖的含量。
需自备的仪器和用品
酶标仪/可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、96孔板/微量石英比色皿、甲苯、硫酸(不允许快递)和蒸馏水。
试剂的组成和配制
试剂一:甲苯10mL×1瓶,4℃保存;(自备)
试剂二:液体6mL×1瓶,4℃保存;
试剂三:液体40mL×1瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×1瓶,4℃保存; 临用前加入5mL蒸馏水和45mL浓硫酸充分溶解待用。
样品处理
新鲜土样自然风干或37度烘箱风干,过30~50目筛。
加样表和测定步骤
|
对照管 |
测定管 |
风干土样(g) |
0.05 |
0.05 |
试剂一 (μL) |
50 |
50 |
振荡混匀15min |
||
试剂二(μL ) |
|
90 |
试剂三(μL ) |
370 |
370 |
蒸馏水(μL ) |
180 |
90 |
37℃振荡反应3h后,90℃水浴15min(盖紧,防止水分散失),冷却后
8000g 25℃离心10min,取上清,得糖化液
糖化液 (μL) |
140 |
140 |
试剂四 (μL) |
260 |
260 |
混匀, 90℃水浴10min(盖紧,防止水分散失),冷却,取200μL至微量石英比色皿或96孔板中,测620nm下吸光值A,计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。
S-CL活力计算
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为y = 5.018x - 0.0462;x为标准品浓度(mg/mL),y为吸光值。
单位的定义:每天每g土样中产生1mg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
S-CL活力(mg/d/g)=(ΔA+0.0462) ÷5.018×V反总÷W÷T =19.1×(ΔA+0.0462)
T:反应时间,3h=1/8d; V反总:反应体系总体积:0.6mL;W:样本质量,0.05g。
b.用96孔板测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为y = 2.5090x - 0.0462;x为标准品浓度(mg/mL),y为吸光值。
单位的定义:每天每g土样中产生1mg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
S-CL活力(mg/d/g)=(ΔA+0.0462) ÷2.5090×V反总÷W÷T =38.3×(ΔA+0.0462)
T:反应时间,3h=1/8d; V反总:反应体系总体积:0.6mL;W:样本质量,0.05g。
注意事项
本产品仅作科研用途!