• 说明书丨HRD2221-Anti-DYKDDDDK磁珠.pdf

产品信息

产品描述

      Anti-Flag免疫磁珠由高质量的鼠源单克隆Anti-Flag抗体与纳米级磁珠共价偶联制备，与当前国际免疫磁珠市场上同类产品相比，该产品具有更多的抗体结合位点，磁珠使用量更少，非特异性结合率低，可便捷高效地进行免疫沉淀实验。纳米级磁珠提供的超大比表面积，大幅缩短抗体与抗原吸附所需的平衡时间，10分钟内即可完成抗体吸附过程，30分钟内完成抗原沉淀操作。简短的操作时间避免长时间操作造成目标蛋白被水解，保证了目标蛋白的活性及蛋白复合物的完整性。本产品可广泛应用于细胞裂解物、细胞分泌上清、血清、腹水等样品中抗原的免疫沉淀反应和少量蛋白质的纯化。

储存条件

pH 6-8，4^oC长期稳定，禁止产品冻结。

使用说明

磁珠的准备

1. 用移液枪轻柔吹打重悬Anti-Flag免疫磁珠，转移25-50μL混合液到新的离心管中。

2. 加入500μLTBS，用移液枪轻柔吹打重悬Anti-Flag免疫磁珠，磁力架上静置10s后, 去除上清，重复上述步骤2次。   

注意：多个样品时，磁珠预处理后再分装到各个反应管中。

样品的结合

3. 在上述沉淀中加入500μL细胞裂解液，室温缓慢孵育2小时或者4°C条件下过夜。

4. 磁力架上静置10s后，将上清液转移到新的离心管中备用（上清液可用于检测Flag-tag蛋白是否存在残留）。

注意：结合过程中，磁珠可能会出现聚团或呈片状，属于正常现象，不会影响实验结果。

洗涤

5. 使用0.5 mL TBS缓冲液洗涤第4步中的沉淀。

6. 重复洗涤大约3次，直到洗涤后的上清液中OD₂₈₀小于0.05为止。

注意：如上清液的OD₂₈₀大于0.05，适当增加洗涤次数。

蛋白洗脱

7. 根据下游用途选择洗脱方法。对于直接检测目的蛋白的情况，在上述所得沉淀中加入50μL 1×蛋白上样缓冲液，煮沸5min，冷却至室温并在磁力架上静置10s。

8. 取上清进行SDS-PAGE检测。

常见问题及对策

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2）本产品仅作科研用途！