价格:400
货号Plant DNAzol Reagent 植物总DNA提取试剂

产品详情
产品详情
产品信息
产品名称 |
产品编号 |
规格 |
Plant DNAzol Reagent 植物总DNA提取试剂 |
HRN0148 |
100mL |
Plant DNAzol Reagent 植物总DNA提取试剂 |
HRN0149 |
500mL |
产品描述
本产品适用于抽提植物的基因组 DNA。提取方法简单快速,60 分钟内完成多个样品的处理。获得的 DNA 可直接用于 Southern 杂交、PCR、DNA克隆以及其他相关分子生物学实验操作。因其采用沉淀的方法,可以将不同大小片段的 DNA 全部沉淀下来,对于凋亡的 DNA 提取也非常有效。
产品组分
试剂盒组成 |
保存 |
100 mL |
备注 |
DNAzol reagent |
RT避光 |
100 mL |
|
氯仿 |
室温 |
100 mL |
自备 |
异丙醇 |
室温 |
50 mL |
自备 |
75%乙醇 |
室温 |
100 mL |
自备 |
RNase-free H2O |
室温 |
20 mL |
自备 |
应用范围
适用于各种动植物基因组DNA的快速抽提
使用方法
一、组织样品的破碎
1.液氮破碎
1)将 100mg~500mg 的组织(叶片/花/茎/根/种子均可)用剪刀剪碎,在加液氮的条件下在研磨钵中捣成粉末,研磨时应间断加入液氮以防止组织融化。
2)研磨充分后加入 1ml Plant DNAzol,β-巯基乙醇继续研磨,可将研钵底部放置 65℃水浴使组织慢慢融化。继续研磨使组织完全裂解(裂解产物应呈粘稠液体)。
3)转移750μl裂解产物至1.5ml离心管中。将离心管置65℃水浴30min。(对于葡萄等纤维比较多的组织适当延长时间)。
2.外力破碎
1)将 100mg~500mg 的组织(叶片/花/茎/根/种子均可)用剪刀剪碎,置于研钵或者匀浆器中,加入少量 Plant DNAzol(100~200μl),用力研磨。
2)研磨充分后加入 Plant DNAzol 800~900μl(与之前所加 PlantDNAzol 总和是 1ml),2μl β-巯基乙醇继续研磨,使组织完全裂解(裂解产物应呈粘稠液体)。
3)转移750μl裂解产物至1.5ml离心管中。将离心管置65℃水浴30min。(对于葡萄等纤维比较多的组织适当延长时间)
二、DNA沉淀
1.加 750μL 氯仿,混合均匀。12000rpm,离心 5 分钟。
2.小心取上清(DNA 在上层,宁可少取上清,也不要吸到中间的蛋白),转入一新的 1.5mL管(这时体积大概有 600μL)。
3.加 0.7 体积的异丙醇(约 420μL),12000rpm,离心 10 分钟,弃上清。(可以直接倒掉,小心不要倒掉沉淀)。
三、DNA清洗
1.加入 1 mL 75%乙醇至离心管中,颠倒数次以重悬 DNA,室温6000rom,离心3~5分钟,倾去或吸除洗涤液。
2.重复清洗 1 次。
3.最后简短离心,用枪头小心吸弃残留液体。
四、DNA溶解
1.室温静置约10分钟,使残余乙醇挥发,注意不要完全晾干DNA。
2.加入适量(100~200μL)灭菌双蒸水或 TE 缓冲液,使 DNA 沉淀溶解。
3.若 DNA 溶液中存在不可溶杂质,可于 4℃、12,000rpm离心10分钟,以去除杂质。
4.4℃或-20℃保存 DNA 溶液。
运输和保存方法
常温运输。常温、避光保存,有效期2年。
注意事项
1.本产品可能会有盐析出,加热溶解后不影响使用效果。
2.提取的 DNA 可能有少量 RNA 污染,一般不影响使用。如需去除 RNA,可向 DNA 溶液中加入终浓度 40ug/ml 的 RNase A ,37℃孵育 30 分钟。
3.请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
4.本产品仅作科研用途!