Plant DNAzol Reagent 植物总DNA提取试剂

Plant DNAzol Reagent 植物总DNA提取试剂

价格:400

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产品详情

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产品信息

 

产品名称

产品编号

规格

Plant DNAzol Reagent 植物总DNA提取试剂

HRN0148

100mL

Plant DNAzol Reagent 植物总DNA提取试剂

HRN0149

500mL

 

产品描述

 

    本产品适用于抽提植物的基因组 DNA。提取方法简单快速,60 分钟内完成多个样品的处理。获得的 DNA 可直接用于 Southern 杂交、PCR、DNA克隆以及其他相关分子生物学实验操作。因其采用沉淀的方法,可以将不同大小片段的 DNA 全部沉淀下来,对于凋亡的 DNA 提取也非常有效。

 

产品组分

 

试剂盒组成

保存

100 mL

备注

DNAzol reagent

RT避光

100 mL

 

氯仿

室温

100 mL

自备

异丙醇

室温

50 mL

自备

75%乙醇

室温

100 mL

自备

RNase-free H2O

室温

20 mL

自备

 

 

应用范围

 

适用于各种动植物基因组DNA的快速抽提

 

使用方法

 

一、组织样品的破碎

1.液氮破碎

1)将 100mg~500mg 的组织(叶片/花/茎/根/种子均可)用剪刀剪碎,在加液氮的条件下在研磨钵中捣成粉末,研磨时应间断加入液氮以防止组织融化。
2)研磨充分后加入 1ml Plant DNAzol,β-巯基乙醇继续研磨,可将研钵底部放置 65℃水浴使组织慢慢融化。继续研磨使组织完全裂解(裂解产物应呈粘稠液体)。
3)转移750μl裂解产物至1.5ml离心管中。将离心管置65℃水浴30min。(对于葡萄等纤维比较多的组织适当延长时间)。

2.外力破碎

1)将 100mg~500mg 的组织(叶片/花/茎/根/种子均可)用剪刀剪碎,置于研钵或者匀浆器中,加入少量 Plant DNAzol(100~200μl),用力研磨。
2)研磨充分后加入 Plant DNAzol 800~900μl(与之前所加 PlantDNAzol 总和是 1ml),2μl β-巯基乙醇继续研磨,使组织完全裂解(裂解产物应呈粘稠液体)。
3)转移750μl裂解产物至1.5ml离心管中。将离心管置65℃水浴30min。(对于葡萄等纤维比较多的组织适当延长时间)

二、DNA沉淀

1.加 750μL 氯仿,混合均匀。12000rpm,离心 5 分钟。
2.小心取上清(DNA 在上层,宁可少取上清,也不要吸到中间的蛋白),转入一新的 1.5mL管(这时体积大概有 600μL)。
3.加 0.7 体积的异丙醇(约 420μL),12000rpm,离心 10 分钟,弃上清。(可以直接倒掉,小心不要倒掉沉淀)。

三、DNA清洗

1.加入 1 mL 75%乙醇至离心管中,颠倒数次以重悬 DNA,室温6000rom,离心3~5分钟,倾去或吸除洗涤液。
2.重复清洗 1 次。
3.最后简短离心,用枪头小心吸弃残留液体。

四、DNA溶解

1.室温静置约10分钟,使残余乙醇挥发,注意不要完全晾干DNA。
2.加入适量(100~200μL)灭菌双蒸水或 TE 缓冲液,使 DNA 沉淀溶解。
3.若 DNA 溶液中存在不可溶杂质,可于 4℃、12,000rpm离心10分钟,以去除杂质。
4.4℃或-20℃保存 DNA 溶液。

 

 

 

运输和保存方法

 

常温运输。常温、避光保存,有效期2年。

 

注意事项

 

1.本产品可能会有盐析出,加热溶解后不影响使用效果。

2.提取的 DNA 可能有少量 RNA 污染,一般不影响使用。如需去除 RNA,可向 DNA 溶液中加入终浓度 40ug/ml 的 RNase A ,37℃孵育 30 分钟。

3.请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

4.本产品仅作科研用途!

 

 

 

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