产品信息

产品描述

      链霉亲和素-生物素（SA-Biotin）系统具有极高的结合亲和力（Kd=10^-15），在生物领域具有广泛的应用。链霉亲和素磁珠由高质量的链霉亲和素蛋白与纳米级磁珠共价偶联制备，与当前国际市场上同类产品相比，该产品具有更多的结合位点，磁珠使用量更少，非特异性结合率低，可高效结合生物素化抗体、核酸、蛋白等配体分子，进行免疫沉淀实验，DNA-蛋白相互作用研究，纯化生物素化核酸蛋白。本产品可配套自动化设备进行高通量操作。

储存条件

在2-8°C稳定保存，保质期一年。

使用说明

1. 使用前准备

1.1 缓冲液：以下为常用的缓冲液成分，用户可根据需要调整缓冲液的盐浓度及pH

Buffer I（适用于结合生物素化核酸）：10 mM Tris-HCl（pH 7.5），1 mM EDTA，1 M NaCl，0.01%~0.1% Tween-20

Buffer II（适用于结合生物素化抗体/蛋白）：PBS，pH 7.4，含 0.05% Tween-20，可根据需要添加0.01%~0.1% BSA

1.2 磁性分离器、漩涡振荡器、旋转混合仪、移液器及吸头、合适的离心管

2. 结合生物素化核酸

2.1. 将磁珠瓶置于漩涡振荡器上20 s，振荡重悬磁珠。用移液器移取100 μL磁珠到新的离心管中。将离心管置于磁性分离器上，静置1 min（此操作后续简称为磁性分离），用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下离心管。

备注：用户可根据生物素化分子的多少，参考产品信息表中磁珠的载量，计算需要取用的磁珠量。建议生物素化分子的加入量为磁珠载量的1~2倍，使磁珠饱和。

2.2. 加入1 mL Buffer I到离心管中，盖上离心管盖，充分振荡重悬磁珠。磁性分离，移去上清液。

备注：当步骤2.1取用磁珠体积大于1 mL时，加入与磁珠体积相同的Buffer I。

2.3. 重复“步骤2.2”一次。

2.4. 加入500 μL 的用Buffer I 稀释的生物素化核酸（使磁珠浓度为2 mg/mL），充分振荡重悬磁珠。将离心管置于旋转混合仪上，室温旋转混合30 min。

2.5. 磁性分离，将上清液转移至新的离心管。

2.6. 按“步骤2.2”的方法洗涤磁珠三次。

2.7. 根据后续实验的要求，加入合适的低盐缓冲液，重悬磁珠。至此结合生物素化核酸步骤完成。磁珠可用于后续操作。

2.8. 用户可以通过测定反应前后核酸的浓度，计算结合到磁珠上的核酸量（（反应前浓度-反应后浓度）×反应溶液体积）。

3. 结合生物素化抗体/蛋白操作流程

3.1 将磁珠瓶置于漩涡振荡器上20 s，振荡重悬磁珠。用移液器移取100 μL磁珠到新的离心管中。磁性分离，用移液器吸去上清液，从磁性分离器上取下离心管。

备注：用户可根据生物素化分子的多少，参考产品信息表中磁珠的载量，计算需要取用的磁珠量。建议生物素化分子的加入量为磁珠载量的 1~2倍，使磁珠饱和。

3.2 加入1 mL Buffer II到离心管中，盖上离心管盖，充分振荡重悬磁珠。磁性分离，移去上清液。

备注：当步骤3.1取用磁珠体积大于1 mL时，加入与磁珠体积相同的Buffer II。

3.3 重复“步骤 3.2”两次，共洗涤三次。

3.4 加入1 mL用Buffer II稀释的生物素化抗体/蛋白（使磁珠浓度为1 mg/mL），充分振荡重悬磁珠。将离心管置于旋转混合仪上，室温旋转混合60 min。

3.5 磁性分离，将上清液转移至新的离心管。

3.6 按“步骤3.2”的方法洗涤磁珠五次。

3.7 根据后续实验的要求，加入Buffer II或其他合适的缓冲液，重悬磁珠。至此结合生物素化抗体/蛋白步骤完成。磁珠可用于后续操作。

注意事项

1. 应避免对磁珠进行冷冻等操作。

2. 为减少磁珠损失，每次磁性分离的时间应不少于1 min。

3. 从磁珠保存管中移取磁珠前应充分震荡重悬均匀。操作过程中应避免产生气泡。

4. 建议使用质量好的移液器吸头和反应管，避免因粘附磁珠及溶液而造成损失。

5. 生物素化分子的大小会影响磁珠的载量。用户需要根据实验确定磁珠对特定生物素化分子的载量。

6. 生物素化分子的加入量应为磁珠载量的1~2倍，以使磁珠饱和。

7. 本产品仅供研究使用。