Agarose琼脂糖

Agarose琼脂糖

价格:219

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产品信息

 

产品名称

产品编号

规格

Agarose琼脂糖

HRF1011

100 g

Agarose琼脂糖

HRF1012

500 g

 

产品描述

 

琼脂糖(Agarose)是纯化的线性半乳聚糖亲水胶体,提取自琼脂或者含琼脂的海藻,结构上是一种线性聚合物,由β-D-吡喃半乳糖(1-4)连接3,6-脱水α-L-吡喃半乳糖基构成。作为一种凝胶试剂,常用于通过凝胶电泳或者印迹法(如Northern或Southern)来进行日常核酸分析,也适用于蛋白应用,如辐射状免疫扩散(RID)实验。
琼脂糖的基本参数,包括:
1)硫酸盐含量(sulfate content)——纯度指标,因为硫酸根是存在琼脂糖内的主要离子基团;
2)凝胶强度(gel strength)——施加于凝胶使之断裂的外力;
3)胶凝点(Gel point)——水溶性琼脂糖溶液冷却后形成凝胶时的温度。液体向凝胶转化的过程中,琼脂糖溶液具有滞后性,因此,胶凝点不等同于胶熔点;
4)电渗(EEO)——液体穿透凝胶的一种电动运动。琼脂糖凝胶内的阴离子基团吸附在基质上不会发生迁移,但是解离的阳离子就会朝负极迁移,从而产生电渗。由于生物聚合物的电泳迁移通常是朝负极运动,则EEO产生的内部对流会干扰分离效率。


产品性质

 

CAS号(CAS NO.)

9012-36-6

外观(Appearance)

白色至类白色粉末

凝胶强度(Gel Strength, 1.0%)

≥1200 (g/cm2)

胶凝温度域(Geling Range, 1.5%)

36±1.5℃

熔胶温度域(Melting Range, 1.5%)

88±1.5℃

电渗值(EEO, -mr)

≤0.13

硫酸盐(Sulfate, %)

≤0.15%

水分(Moisture)

≤10%

DNA酶(DNase)

None Detected

RNA酶(RNase)

None Detected

蛋白酶(Protease)

None Detected

 

运输和保存方法

室温运输和保存即可。有效期5年。

 

操作流程:

 

1.凝胶制备方法

1.配制适量的电泳及制胶用的缓冲液。根据电泳需要,配置合适浓度的电泳及制胶缓冲液。

注:用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须是相同的。

2.根据制胶量及凝胶浓度,在加有一定量的电泳缓冲液的三角锥瓶中,加入准确称量的琼脂糖粉(总液体量不宜超过三角锥瓶的 50%容量)。

2.在微波炉中加热溶解琼脂糖,设置高火加热至沸腾,保持胶液沸腾约 30 秒钟,戴上防热手套,移开三角锥瓶,小心摇动三角锥瓶,重悬未溶解颗粒,再次用高火加热 1-2 分钟,或直至琼脂糖完全溶解。请戴上防热手套,小心摇动三角锥瓶,使琼脂糖胶液充分均匀。

注:必须保证琼脂糖充分完全溶解,此时琼脂糖胶液清澈,否则,会造成电泳图像模糊不清。

加热时如胶液剧烈沸腾发泡,停止加热。微波炉中加热时间不宜过长。

4.使溶液冷却至 60℃左右,如需要可在此时加入溴化乙锭(EB)溶液使其终浓度为0.5ug/ml,

并充分混匀。

注:溴化乙锭是一种致癌物质。使用含有溴化乙锭的溶液时,请戴用手套。

5.将琼脂糖溶液倒入制胶模中,然后在适当位置处插上梳子。凝胶厚度一般在 3-5mm 之间。

6.在室温下使胶凝固(大约 30 分钟-1 小时),然后放置于电泳槽中进行电泳。

注:凝胶不立即使用时,请用保鲜膜将凝胶包好后在 4℃下保存,一般可保存 2~5 天。

 

琼脂糖浓度与 DNA 分离范围

琼脂糖浓度(%)

0.3

0.6

0.7

0.9

1.2

1.5

2.0

线状 DNA 大小(kb)

60-5

20-1

10-0.8

7-0.5

6-0.4

4-0.2

3-0.1

 


注意事项

1)可用煮沸或微波加热的方法来熔胶,琼脂糖熔化必须彻底。熔胶可能会引起暴沸,需注意防止烫伤。

2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

3)本产品仅作科研用途!

 

 

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