价格:219
货号Agarose琼脂糖
产品详情
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产品信息
产品名称 |
产品编号 |
规格 |
Agarose琼脂糖 |
HRF1011 |
100 g |
Agarose琼脂糖 |
HRF1012 |
500 g |
产品描述
琼脂糖(Agarose)是纯化的线性半乳聚糖亲水胶体,提取自琼脂或者含琼脂的海藻,结构上是一种线性聚合物,由β-D-吡喃半乳糖(1-4)连接3,6-脱水α-L-吡喃半乳糖基构成。作为一种凝胶试剂,常用于通过凝胶电泳或者印迹法(如Northern或Southern)来进行日常核酸分析,也适用于蛋白应用,如辐射状免疫扩散(RID)实验。
琼脂糖的基本参数,包括:
1)硫酸盐含量(sulfate content)——纯度指标,因为硫酸根是存在琼脂糖内的主要离子基团;
2)凝胶强度(gel strength)——施加于凝胶使之断裂的外力;
3)胶凝点(Gel point)——水溶性琼脂糖溶液冷却后形成凝胶时的温度。液体向凝胶转化的过程中,琼脂糖溶液具有滞后性,因此,胶凝点不等同于胶熔点;
4)电渗(EEO)——液体穿透凝胶的一种电动运动。琼脂糖凝胶内的阴离子基团吸附在基质上不会发生迁移,但是解离的阳离子就会朝负极迁移,从而产生电渗。由于生物聚合物的电泳迁移通常是朝负极运动,则EEO产生的内部对流会干扰分离效率。
产品性质
CAS号(CAS NO.) |
9012-36-6 |
外观(Appearance) |
白色至类白色粉末 |
凝胶强度(Gel Strength, 1.0%) |
≥1200 (g/cm2) |
胶凝温度域(Geling Range, 1.5%) |
36±1.5℃ |
熔胶温度域(Melting Range, 1.5%) |
88±1.5℃ |
电渗值(EEO, -mr) |
≤0.13 |
硫酸盐(Sulfate, %) |
≤0.15% |
水分(Moisture) |
≤10% |
DNA酶(DNase) |
None Detected |
RNA酶(RNase) |
None Detected |
蛋白酶(Protease) |
None Detected |
运输和保存方法
室温运输和保存即可。有效期5年。
操作流程:
1.凝胶制备方法
1.配制适量的电泳及制胶用的缓冲液。根据电泳需要,配置合适浓度的电泳及制胶缓冲液。
注:用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须是相同的。
2.根据制胶量及凝胶浓度,在加有一定量的电泳缓冲液的三角锥瓶中,加入准确称量的琼脂糖粉(总液体量不宜超过三角锥瓶的 50%容量)。
2.在微波炉中加热溶解琼脂糖,设置高火加热至沸腾,保持胶液沸腾约 30 秒钟,戴上防热手套,移开三角锥瓶,小心摇动三角锥瓶,重悬未溶解颗粒,再次用高火加热 1-2 分钟,或直至琼脂糖完全溶解。请戴上防热手套,小心摇动三角锥瓶,使琼脂糖胶液充分均匀。
注:必须保证琼脂糖充分完全溶解,此时琼脂糖胶液清澈,否则,会造成电泳图像模糊不清。
加热时如胶液剧烈沸腾发泡,停止加热。微波炉中加热时间不宜过长。
4.使溶液冷却至 60℃左右,如需要可在此时加入溴化乙锭(EB)溶液使其终浓度为0.5ug/ml,
并充分混匀。
注:溴化乙锭是一种致癌物质。使用含有溴化乙锭的溶液时,请戴用手套。
5.将琼脂糖溶液倒入制胶模中,然后在适当位置处插上梳子。凝胶厚度一般在 3-5mm 之间。
6.在室温下使胶凝固(大约 30 分钟-1 小时),然后放置于电泳槽中进行电泳。
注:凝胶不立即使用时,请用保鲜膜将凝胶包好后在 4℃下保存,一般可保存 2~5 天。
琼脂糖浓度与 DNA 分离范围
琼脂糖浓度(%) |
0.3 |
0.6 |
0.7 |
0.9 |
1.2 |
1.5 |
2.0 |
线状 DNA 大小(kb) |
60-5 |
20-1 |
10-0.8 |
7-0.5 |
6-0.4 |
4-0.2 |
3-0.1 |
注意事项
1)可用煮沸或微波加热的方法来熔胶,琼脂糖熔化必须彻底。熔胶可能会引起暴沸,需注意防止烫伤。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3)本产品仅作科研用途!