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产品信息 

正式测定前取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义

生物碱是存在于自然界（主要为植物）中的一类含氮的碱性有机化合物，大多数有复杂的环

状结构，氮素多包含在环内，有显著的生物活性，是中草药中重要的有效成分之一。

测定原理

生物碱与溴甲酚绿指示剂反应，生成绿色化合物，在416nm处有最大吸收峰。

需自备的仪器和用品

酶标仪、水浴锅、超声波清洗器、可调式移液器、96孔板、研钵、80%乙醇、氯仿和蒸馏水。

试剂的组成和配制

试剂一：液体12mL×1 瓶，4℃保存；

试剂二：液体30mL×1 瓶，4℃保存；

试剂三：液体15mL×1 瓶，4℃避光保存；

生物碱的提取

     样本烘干粉碎，过80目筛。称取约0.1g样本，加入1mL80%乙醇，充分混匀后转移到EP

管中，超声波提取60min，8000 g，25℃离心10 min，取上清液待测。

生物碱含量计算

标准条件下测定的回归方程为y=1.915x - 0.0005，R² = 0.9942；x为标准品浓度（mg/mL），y 为 ΔA。

生物碱含量(mg/g 干重)=(ΔA+0.0005)÷1.915×V 样总÷W= 0.522×(ΔA+0.0005) ÷W

V样总：加入提取液体积，1mL；W：样本鲜重，g。

注：本产品仅作科研用途！

测定步骤

1、酶标仪预热30min以上，调节波长至416nm处。

2、操作表：在EP管中加入如下试剂

剧烈振荡混匀，室温静置40min，吸取下层氯仿层200µL于96孔板，416nm处读取吸光值A，ΔA=A 测定-A空白，空白管只要做一管。