价格:360
货号维生素E（Vitamin E，VE）试剂盒
产品详情
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产品信息
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产品名称 |
测定方法 |
产品编号 |
规格 |
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维生素E（VE）试剂盒 |
分光光度法 |
HRK2411 |
50管/24样 |
正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
维生素E（Vitamin E）是一种脂溶性维生素，其水解产物为生育酚，是生物体中最主要的抗氧化剂之一，能阻止不饱和脂肪酸收到过氧化作用的损伤，维持不饱和脂肪酸细胞膜的完整性和正常功能，具有延缓衰老、预防溶血性贫血作用，在医药、化妆品、保健品、食品行业具有较高的应用价值。
测定原理
VE还原Fe3+为Fe2+，Fe2+与1,10-菲罗啉产生有色络合物，在530nm有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器
天平、研钵、离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、漩涡震荡仪。
试剂组成和配制
提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体5mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂二：液体5mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体5mL×1瓶，4℃保存。
试剂四：液体15mL×1瓶，4℃保存。
样本处理
1.组织：按照质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约2g，加入1mL提取液）加入提取液，充分匀浆后用提取液定至2mL，在漩涡混匀仪上震荡5min，于25℃，5000g离心10min，取上层测定。
2.细胞：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议1000万细胞加入2mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；在漩涡混匀仪上震荡5min，于25℃，5000g离心10min，取上层测定。
3.血清：取1mL，加1.9mL提取液，漩涡仪混匀上震荡5min，于25℃，5000g离心10min，取上层测定。
测定操作
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对照管 |
测定管 |
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样品（μL） |
500 |
500 |
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试剂一（μL） |
100 |
100 |
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试剂二（μL） |
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100 |
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试剂三（μL） |
100 |
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充分混匀，25℃反应5min |
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试剂四（μL） |
300 |
300 |
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充分混匀，于1mL玻璃比色皿，无水乙醇调零，测定530nm处吸光值，记为A对照管和A测定管，△A=A测定管-A对照管。 |
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计算公式
标准曲线：y = 0.22x + 0.0065， R2 = 0.9978
-按照蛋白含量计算
VE含量（μg/mg prot）=（△A -0.0065）÷ 0.22×V反总÷（V样×Cpr）= 9.09×（△A -0.0065）÷ Cpr
-按照样本质量计算
VE含量（μg/g）=（△A -0.0065）÷ 0.22×V反总÷（V样×W÷V样总）= 18.18×（△A -0.0065）÷ W
-按照细胞数量计算
VE含量（μg/104 cell）=（△A -0.0065）÷ 0.22×V反总÷（V样×细胞数量÷V样总）= 18.18×（△A -0.0065）÷ 细胞数量
-按照液体体积计算
VE含量（μg/mL）=（△A -0.0065）÷ 0.22×V反总÷V样×20= 181.82×（△A -0.0065）
V反总：反应总体积，1mL；：V样：加入样本体积，0.5mL；V样总：加入提取液体积，2mL； Cpr：蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g
注意事项
1.若反应体系产生沉淀，需要将样品进行适当的稀释，并在计算公式中乘以稀释倍数。
2.最低检出限为1μg/g。
3.本产品仅作科研用途！