植物原花青素(Oligomeric Proantho Cyanidins, OPC)试剂盒

植物原花青素(Oligomeric Proantho Cyanidins, OPC)试剂盒

价格:830

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产品信息

 

产品名称

测定方法

产品编号

规格

植物原花青素(OPC)试剂盒

微量法

HRK0552

100管/48样

正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

 

测定意义

 

原花青素(Oligomeric Proantho Cyanidins,OPC)是一类黄烷醇单体及其聚合体的多酚化合物,广泛存在于植物的各种器官中,具有极强的抗氧化性和清除自由基的作用,广泛的应用于医药,食品,化妆品,保健品行业。

 

测定原理

 

在酸性条件下,植物原花青素A环上的间苯二酚和间苯三酚与香草醛发生缩合反应,产生有色化合物,在500nm处有特征吸收峰,测定500nm光吸收值,可计算植物中原花青素的含量。

 

自备实验用品及仪器

 

天平、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水、盐酸、无水乙醇和甲醇。

 

试剂组成和配制

 

提取液60%乙醇,自备,4℃保存。(60mL无水乙醇溶于40mL蒸馏水)

试剂一:8%盐酸10mL,自备,4℃保存。(800μL盐酸溶于9.2mL甲醇)

试剂二:粉剂0.1g×1瓶,4℃避光保存,临用前加10mL甲醇溶解。

测定工作液:临用前按照用量将试剂一和试剂二按照1:1混合。

空白工作液:临用前按照用量将试剂一和甲醇按照1:1混合。

 

OPC提取

 

称取约0.1g样本,加入2mL提取液,匀浆后,60℃振荡提取2h, 10000g,25℃,离心10min,取上清待测。

 

测定操作表

 

1.分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长至500nm,蒸馏水调零。

2.操作表

 

对照管

测定管

样本(μL)

40

40

测定工作液(μL)

 

160

空白工作液(μL)

160

 

混匀,30℃水浴30min,于微量石英比色皿/96孔板中检测500nm处吸光值,ΔA=A测定-A对照,每个测定管设一个对照管。

 

OPC计算公式

 

a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准曲线:y=0.0194x+0.0006,R2=0.999

OPC含量(mg/g 鲜重)= (ΔA-0.0006)÷0.0194×V反总÷(V样÷V样总×W)×10-3= 0.515×(ΔA-0.0006)÷W

V样总:加入提取液体积,2mL; V反总:反应总体积,0.2mL;V样:反应中样品体积,0.04mL;W:样品质量,g

 

b.用96孔板测定的计算公式如下

标准曲线:y=0.0097x+0.0006,R2=0.999

OPC含量(mg/g 鲜重)= (ΔA-0.0006)÷0.0097×V反总÷(V样÷V样总×W)×10-3= 1.03×(ΔA-0.0006)÷W

V样总:加入提取液体积,2mL; V反总:反应总体积,0.2mL;V样:反应中样品体积,0.04mL;W:样品质量,g

 

注意事项

 

1、配制好的试剂二应尽快使用,4℃保存时间不超过一个月。

2、吸光度变化应该控制在0.01~0.8之间。否则加大样品量或稀释样品,注意计算公式中参与计算的稀释倍数要相应改变。

3、最低检出限为10μg/g。

3、本产品仅作科研用途!

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