• 说明书丨HRF0451-BsmBI.pdf

产品信息

产品描述

BsmBI 属于 Type IIs 型限制酶，可识别非回文序列，并在识别序列之外进行切割，常用于 Golden Gate 组装。经过优化的反应 Buffer使 BsmBI 最大限度发挥功能，同时反应缓冲液包含重组白蛋白，其可增强多种酶的稳定性。

酶切位点

5'...C G T C T C (N)₁ ↓ ...3'

3'...G C A G A G (N)₅ ↑ ...5'

同裂酶：Esp3I

注意事项

1.最适反应温度为 55℃

2.对于被 CpG 甲基化的 DNA，剪切可能受阻

3.对于被 EcoBI 甲基化的 DNA，剪切可能受阻

4.失活条件为 80℃ 温育 20 min

5.3 h 温育未表现星号活性，延时酶切可能出现星号活性

6.本产品仅用于科研用途！

运输和保存方法

冰袋运输。-20℃保存，有效期12个月。

产品组成

使用方法

1. DNA酶切流程

① 在冰上按如下建议的加样顺序配制反应体系：

1. DNA底物中应不含苯酚、氯仿、乙醇、EDTA、洗涤剂或高浓度盐，否则将会影响BsmBI酶活性；

② 轻柔吸打或轻弹管壁以混匀（切勿涡旋），然后瞬时离心以收集挂壁液滴；

③ 55℃温育 15 min~1 h，一般推荐 5 U~10 U 酶 /μg 质粒 DNA、10 U~20 U 酶 /μg 基因组 DNA，温浴 1 h，如需过夜酶切反应，请将酶量调整至 1 U；

④ 80℃温育 20 min 即可使酶失活，停止反应，或者通过吸附柱或苯酚 / 氯仿纯化终止反应。

2. 注意事项

① 反应体系中加入的酶体积不应超过总体积的 10%，避免酶中过多的甘油引起星号活性；

② 限制性内切酶存储缓冲液中的添加剂（例如甘油、盐）与底物溶液中的污染物（例如盐、EDTA 或乙醇等）相同，反应体积越小，酶切反应抑制效应越强。

    3. 小体积推荐加样体系

b:为避免蒸发，10 μl 反应体系的孵育时间不应超过 1 h。