价格:1,999
货号醛基磁珠
产品详情
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产品信息:
产品名称 |
产品编号 |
规格 |
醛基磁珠 |
L-4004 |
5mL |
L-4004A |
50mL |
产品描述:
Mag-CHO 系列磁珠表面为醛基修饰,能够与带有伯胺基团的蛋白和其他分子形成稳定的席夫碱结构,用于亲和纯化抗体、抗原和其他生物分子。与传统的羧基、氨基磁珠相比,表面含醛基的磁珠无需先采用戊二醛进行活化,只需简单地将含伯氨基的生物配体溶解在PBS 中,室温下将蛋白与醛基磁珠混合 1~2h 便可将生物配体共价偶联到磁珠上,具有操作简单、偶联条件温和、生物配体偶联快速高效等优点。磁珠偶联过程必须在不含任何氨基的缓冲溶剂中进行。人工操作时,使用磁性分离架实现磁珠与溶剂分离。也可采用自动化设备操作,自动化操作适合用于多样品的筛选。
产品特性:
1、基本信息
项目 |
特性 |
粒径 |
200 nm |
结合能力 |
≥ 100 ug 兔 IgG/mg 磁珠 |
浓度 |
10 mg/mL |
保存液 |
ddH2O |
保质期 |
在 2∽8℃稳定保存,保质期两年 |
注:结合能力与生物配体本身特性有关,此处仅做参考值。
2、与不同分子量蛋白结合能力
Protein |
分子量 (kDa) |
磁珠结合能力 (ug/mg of bead) |
IgG |
150 |
100 |
Streptavidin |
53 |
50 |
Protein A/G |
50 |
45 |
Protein G |
29 |
60 |
注:结合量会受蛋白质活性伯胺基团和仲胺基团的数量影响。
操作流程:
磁珠与生物分子的偶联方法(参考,以蛋白 A/G 为例)
- 磁珠预处理:混匀磁珠后,取 500μL Mag-CHO 磁珠到 1.5mL EP 管中,磁吸去除上清液,用 1mL PBS 溶液(0.1M,pH 7.4)洗涤 2 次,磁吸去除上清;
- 磁珠偶联:向装有磁珠的 EP 管中加入 50~200μg 生物配体(合适用量及浓度需要根据具体实验进行优化,保持溶液 pH≈8.0,必要时可加入 0.05% Tween-20 以提高磁珠分散性),轻柔地混匀;用锡箔纸包裹(反应避光)后25℃偶联 1∽4h,或放置 4℃偶联过夜,偶联期间保持磁珠的悬浮状态(可利用垂直混合仪进行颠倒混匀);
- 封闭:将 EP 管置于磁分离架上磁性分离去除上清液,加入 500∽1000μL 封闭液(乙醇胺,甘氨酸,Tris 等)重悬磁珠,25℃反应 2∽4h 或 4℃反应过夜,封闭磁珠表面未反应位点,该期间保持磁珠的悬浮状态(可利用垂直混合仪进行颠倒混匀);
- 保存:将 EP 管置于磁性分离架上磁性分离去除上清液,用 500μL PBS 溶液(pH 7.2)或保存溶液洗涤 3 次后,重新悬浮于保存溶液中(可根据需要来确定保存溶液的加入量,以调整偶联配体磁珠的浓度),最后保存于 4℃。必要时可以在保存溶液中加入 0.02%(w/v)叠氮化钠(NaN3)抑制细菌生长。
注意事项:
1.进行实验操作之前,请务必认真阅读本操作说明书。
2.磁珠保存在 ddH2O 中,冷冻、干燥和离心等操作会引 起磁珠团聚,不易于重悬和分散,并且影响磁珠表面功能 基团的化学活性。
3.在使用本产品前,请务必充分振荡或超声使磁珠保持均 匀的悬浮状态。
4.本产品需与磁性分离设备配套使用。
5.磁珠使用前应充分振荡均匀。磁珠应保存在储存溶液 中,防止干燥。
6.本产品仅供科学研究使用