• Minute™ 骨组织总蛋白提取试剂盒 SA-02-BT_CN.pdf

产品信息

产品描述

     骨组织通常用于研究的有两种类型：密质骨和松质骨。骨组织中的细胞紧密堆积，由于其独特的结构，很难有效地从中提取总蛋白质。使用传统的溶液法提取蛋白质如 RIPA 效率低，产率也很低，提取的蛋白质图谱也是不完整的。本试剂盒利用离心管技术以及优化的裂解液，利用物理研磨和化学裂解相结合，提供了一种简单和快速的从人或动物骨组织中提取蛋白质的高效方法。可根据特定的下游应用选择变性裂解液或天然裂解液。整个过程不到 10 分钟即可完成，蛋白质得率根据骨骼样品类型不同在 0.5-2mg/ml 范围。试剂盒所提供试剂及耗材可以满足 50 个样品实验。

应用

用该试剂盒提取的蛋白质可用于许多下游应用，如 SDS-PAGE, WB,IP,ELISA,酶活性测定和蛋白质组学分析。缓冲剂与

IMAC 树脂兼容，可用于 His 标签蛋白纯化。在质谱分析之前需将提取的蛋白质样品中的盐和表面活性剂除去。

使用说明

为实验操作方便建议大家按照采用推荐的样品量和裂解液。本操作可以按照比例放大或者缩小。骨组织蛋白提取前，骨组织

需要通过机械手段（骨破碎机，搅拌机，或剪刀等）粉碎成小块或粉末。试着尽可能多地解剖和去除附着在骨组织上的脂肪

和肌肉。室温操作即可。

1.称取 50-100mg（冷冻或新鲜）粉碎的骨组织，放置到离心管柱中。

2.加入 50-80mg 蛋白研磨粉覆盖组织样品，加入 100ul 裂解液。

3.立刻用塑料研磨棒按住组织扭转研磨 2-3min，将剩余的 100ul 裂解液加入，继续研磨 30s-1min。注意：塑料研磨棒

可以重复使用，用 70%的酒精彻底冲洗干净，用纸巾擦干。

4.盖上盖子，台式离心机最高转速离心 1min，弃掉离心管柱。收集管中的上清就是提取的总蛋白，将其转移到一个新管

中。管底的白色沉淀是穿过柱子的蛋白研磨粉，弃掉即可

储存条件

常温。

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2）本产品仅作科研用途！