• 说明书丨HRN0291-DNASE I柱上消化试剂盒(RNase free).pdf

产品信息

产品描述

      任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA的微量残留，本公司RNA提取产品，由于采取了特别的缓冲体系和特殊硅胶吸附膜，可以去除绝大多数的DNA污染，所以一般不用进行DNase I 消化。但是对于一些敏感的下游实验，需要去除微量的DNA残留，可以购买本公司DNase I柱上消化试剂盒（RNase free），直接在离心吸附柱上面消化残留的DNA，然后纯净RNA可以洗脱下来直接使用。本产品兼容所有硅胶膜离心柱式RNA提取试剂盒。

产品特点

1.简单快速，条件经过优化，一般15分钟可以消化清除硅胶膜上残留DNA。

2.确保RNase free， 可以保证RNA分子完整性。

3.兼容性广，可整合进所有硅胶膜离心柱式RNA提取试剂盒柱上消化，不需要提取到总RNA后再单独去除里面的残留DNA。

运输和保存方法

1）DNase Buffer -20 ℃保存， 去蛋白液RW1常温或者4 ℃保存，RNase free DNase－20 ℃保存，避免反复冻融。

2）注意：DNase Buffer含Mn²⁺，可能有轻度发黄发黑，甚至黑色沉淀为正常现象，颠倒混匀后正常使用即可。

注意事项

1.DNase是非常敏感，易物理损坏变性丧失活性，所以不要漩涡混匀DNase I和工作液。轻轻吹打或者上下颠倒混匀混合液。每次在抽提RNA抽提前配置新鲜的工作液。

2.DNase I buffer是和RNase-free DNase I配套专门用于柱上消化，一般的10 x DNase buffer 并不能用于膜上的DNase 消化，不能替代。

3.本产品仅作科研用途！

使用方法

1.按照正常RNA提取步骤操作，裂解混合物过柱离心完全后（RNA包括残留DNA吸附到离心柱硅胶膜上），加入去蛋白液RW1步骤前按照以下步骤操作。

2.取一个新的1.5ml离心管，加入45μl DNase I buffer和5μl RNase free DNase I，轻轻吹打混匀成DNase I工作液（处理多个离心柱子要按照比例放大制备工作液）。置冰上备用。

注：如果残留DNA过多导致消化不完全，可按比例加大使用酶量来提高消化效果（如90μl DNase I buffer和10μl RNase free DNase I）。

3.向吸附柱RA 中加入350μl去蛋白液RW1，12,000 rpm 离心30 秒，弃废液，将吸附柱放回收集管中。

4.向吸附柱RA 中央加入50μl 的DNase I 工作液，室温（20-30℃）放置15 分钟。注意直接将工作液滴在膜中央上，不要让工作液滴在O型圈或是离心柱管壁上。

5.向吸附柱RA 中加入350μl去蛋白液RW1， 12,000 rpm 离心30-60 秒，弃废液，将吸附柱放回收集管中。

6.接漂洗液RW步骤等后续步骤。如果是其它公司试剂盒，则接最后的一个漂洗液漂洗等后续步骤。。