TEV Protease烟草蚀纹病毒蛋白酶

TEV Protease烟草蚀纹病毒蛋白酶

价格:986

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品信息

 

产品名称

产品编号

规格

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价格(元)

TEV Protease烟草蚀纹病毒蛋白酶

HRX0191

1000 U

-20℃

899

TEV Protease烟草蚀纹病毒蛋白酶

HRX0192

10×1000 U

-20℃

7580.00

TEV Protease烟草蚀纹病毒蛋白酶

HRX0193

10 KU

-20℃

6400.00

TEV Protease烟草蚀纹病毒蛋白酶

HRX0194

50 KU

-20℃

26100.00

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产品描述

      TEV Protease(His-tag)是一种在大肠杆菌中重组表达的带组氨酸标签(6X His tag)的烟草蚀纹病毒的半胱氨酸蛋白酶,强特异性的识别七氨基酸序列:Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln-Gly/Ser(EXXYXQ↓(G/S)),切割位点在Gln和Gly/Ser之间,常用于去除融合蛋白的亲和标签:如GST、His或者其它标签。TEV的最佳酶切温度是30℃,在29℃-34℃之间均具有较高的活性,但温度高于37℃时,酶的活性会急剧下降。一般认为30℃,pH 7.0时可达到最佳活性。另外TEV切割后也能利用其N端的6×His标签,通过Ni-NTA树脂去除,以达到纯化目的蛋白的目的。

 

产品性质

 

属性

描述

来源(Source)

大肠杆菌E.Coli

外观(Appearance)

无色透明液体

比活力(Specific Activity)

5 U/μL

活性定义(Unit Definition)

在1×TEV Buffer(50 mM Tris,pH 8.0,0.5 mM EDTA,1 mM DTT)中,30℃,pH8.0条件下反应1小时,能够切割3µg对照底物达85%以上所需的酶量为一个活性单位。

纯化(Purification)

Ni柱亲和纯化

纯度(Purity)

≥97%(by SDS-PAGE)

 

产品组分

 

编码

组分名称

货号/规格

HRX0191/1000U

HRX0192/10×1000U

HRX0193/10KU

HRX0194/50KU

HRX019-A

TEV Protease(5 U/μL)

200 μL

10×200 μL

2×1 mL

10 mL

HRX019-B

TEV Buffer (10×)

600 μL

10×600 μL

6 mL

30 mL


运输与保存方法

袋运输。

TEV Buffer于-20℃保存,一年稳定。TEV Protease,-20℃保存,6个月稳定;-70℃长期保存,一年稳定。收到货请及时分装各组分后使用,避免反复冻融。


应用实例

1. 在EP管中配制如下反应体系。

组分

用量

靶标融合蛋白

40 μg

TEV Protease (5 U/μL)

4 μL

TEV buffer(10×)

10 μL

ddH20(Utra Pure)

补充到 150 μL

2. 30℃孵育,在1、2、4、6小时分别吸出32 μL上述反应液,置于单独的EP管中。

3. 向上述EP管中加入8 μL 5×SDS Loading Buffer,置于-20℃。

4. 样品全部反应完毕后,上述不同时间获得的样品分别煮沸10 min后,取25-30 μL样品进行蛋白质SDS-PAGE电泳分析,以确定最佳反应时间。某些融合蛋白如需要在低温下确保酶活性,则应将反应混合液放在4℃环境下,同时增加TEV酶的用量并适当延长反应时间,以确保酶的切割效果。

 

注意事项

1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

2. 本产品仅作科研用途!

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