• 说明书丨HRF1071-RNAhold Tissue Stabilizer RNAhold动植物组织RNA保护液.pdf

产品信息

产品描述

      RNA酶广泛存在环境中，很容易降解新鲜采取的动植物组织、血液、体液等样本中的RNA，从而使得研究人员在收集完新鲜样本需要做液氮速冻，或者立即进行RNA的纯化，这给研究人员的户外工作带来诸多不便。

      RNA保护液（RNA Stabilizer）是专门开发用于稳定并保护采集样本内RNA，作为一种无毒溶液，可迅速渗入组织，灭活内源RNase。

产品特点

操作极其简便：只需要将新鲜组织切成合适大小（≤0.5 cm）的组织块，浸入5~10倍体积的RNAhold中即可。

稳定周期长：经RNAhold浸润的组织/细胞可在37℃保存1天，室温保存1周，4℃保存4周，-20℃/-80℃长期保存。

下游兼容性广：几乎兼容于所有的RNA分离方法，如HRbio™ Total RNA Extraction Reagent，以及几乎所

有的商业化RNA抽提试剂盒，包括离心柱抽提法，磁珠纯化法等。

材料应用性广：可用于多种动植物组织（如脑、心脏、肝脏、胰脏、肾脏、脾脏、睾丸、肌肉、植物的茎叶等）的保存，还可用于酵母、组织培养细胞等。

操作流程

1. 样品处理

A. 动物组织：RNAhold稳定液不会破坏动物组织结构的完整性。

处理过程：将组织切成合适大小后（≤0.5 cm），然后加入5倍体积RNAhold。

注：已浸入RNAhold的组织经平衡一段时间后，可从溶液中取出，切成更小的组织块（≤0.5 cm大小），再重新放回RNAhold。

注意：某些组织（如骨头）具有比较弱的液体渗透性，不适合用本品进行RNA保护。

B. 植物组织：本品对于柔软的植物组织（如嫩叶，嫩茎）可直接渗透，且达到理想的RNA保护效果。

处理过程：将组织切成合适的大小（≤0.5 cm）后，加入5倍体积的RNAhold稳定液。

注：某些植物组织天生具有的屏障（如叶子表面的蜡层）可阻碍RNAhold渗透，对于此类组织，往往需要破坏这些屏障层以允许溶液的浸透。

C. 组培细胞、白细胞等：按照标准实验操作收集细胞沉淀（用PBS清洗1-2次）。之后加入5～10倍体积的RNAhold。

D. 酵母：离心弃上清，收集约10⁸个细胞(12,000g，2 min)。加入0.5～1 mLRNAsafe。

长期保存：应置于RNAhold中，4℃放置1小时。然后离心弃上清，收集酵母细胞(12,000g，5 min)，-80℃保存。

2. 样品保存

A. -80℃保存：样品结冻保存。对于归档的样本，建议-80℃保存。该保存条件下，样本可长期保存，保护效果最佳。

操作过程：样本4℃浸透过夜，然后再转移至-80℃。

如果中间需要做样本的融化，建议取出4℃浸透过夜的组织或离心收集细胞，然后再冻存于-80℃。RNAhold保护后的样本抽提RNA时，可直接放在室温融化，之后重新冻上，不会造成RNA量的严重损失或者RNA完整性的明显破坏。

B. -20℃保存：同样适用于归档样本的保存。样本不会在-20℃结冻，但可能会形成结晶。该保存条件下，样本可长期保存，不会对后续RNA分离造成影响。

操作过程：样本4℃浸透过夜，然后再转移至-20℃。RNAhold保护后的样本抽提RNA时，可直接放在室温融化，之后重新冻上，不会造成RNA量的严重损失或者RNA完整性的明显破坏。

C. 4℃保存：大部分样品放到RNAhold中，可稳定保护1个月，不会有明显的RNA降解发生。

D. 25℃（室温）保存：建议低温环境保存。若条件不允许，请将RNAhold稳定液于冰上冷却几个小时，然后将样品浸入此溶液中，室温稳定保存1周，不会有明显的RNA降解发生。
E. 37℃保存：纯化的RNA样本于37℃孵育24 h，结构依然完整。

3. RNA提取

因RNAhold灭活RNase的过程是可逆的，受保护的样本使用前务必不要清洗掉RNAhold。

A. 组织样本：用灭菌镊子从RNAhold中取出组织块，然后用干净的吸水纸吸掉表面液体。之后立即置于裂解液中匀浆。

B：细胞样本：由于RNAhold密度较大，此时需要使用大于普通介质的离心力。一般来说，保存在RNAhold中的细胞能承受更高的转速，并维持细胞的完整性。大部分细胞可通过5,000g，5 min离心收集沉淀。

注意：由于不同细胞承受离心力会有差异，建议先用少量的细胞进行离心速度承受性的测试。

C. 抽提RNA：按照RNA抽提Protocol进行即可。

运输与保存方法

室温运输，室温保存，有效期5年。

注意事项

1. 经RNAhold处理的样本还可做基因组DNA的提取，甚至蛋白质的提取。但由于RNAhold会变性蛋白质，因此不适合天然蛋白的提取。

2. 本RNAhold室温保存过程中可能会产生一些沉淀，在使用前只需放到37℃温育片刻，并间断摇晃重溶，不影响使用。

3. 本RNAhold仅适用于新鲜组织，不可用于冰冻组织。

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

5. 本产品仅作科研用途！