• Minute™ 昆虫组织总蛋白提取试剂盒 SA-07-IS_CN.pdf

产品信息

产品描述

      尽管昆虫的身体组织有很大的差异，但它们的身体结构几乎都是一样的。他们把身体分成三个区域:头部、胸部和腹部。身体部分有坚硬的外骨骼或角质层保护。从蛋白质提取的角度来看，外骨骼的独特结构使其很难均匀化，提取总蛋白也是非常困难的。使用传统的基于溶液法的蛋白质提取方法如RIPA提取蛋白效率低，产率低且提取的蛋白质的图谱不完整。本试剂盒利用离心管技术以及优化的裂解液，利用物理研磨和化学裂解相结合，提供了一种简单和快速的从昆虫中提取蛋白质的高效方法。研究人员可以根据下游实验选择变性裂解液或天然裂解液。整个操作过程不到10分钟即可完成，蛋白产量在1-3 mg/ml范围内。试剂盒所提供试剂及耗材可以满足客户50个样品实验。

应用

     SDS-PAGE, WB，IP，ELISA，酶活性测定和蛋白质组学分析。缓冲剂与IMAC树脂兼容，可用于His标签蛋白纯化。在质谱分析之前需将提取的蛋白质样品中的盐和表面活性剂除去。

使用说明

为实验操作方便建议大家按照采用推荐的样品量和裂解液。本操作可以按照比例放大或者缩小。该操作室温操作即可。

1.称取 20-30mg（冷冻或新鲜）昆虫组织，用剪刀将组织剪成 1x1mm 的小块或者更小一些。将样品放到离心管柱中。

对于果蝇和蚊子这类比较小的昆虫，20-30 只整只昆虫或幼虫无需剪切，可以直接加到离心管柱中。

2.离心管柱中加入 50-80mg 蛋白研磨粉覆盖组织样品，加入 100ul 裂解液。

3.立刻用塑料研磨棒按住组织扭转研磨 2-3min，将剩余的 100ul 裂解液加入，继续研磨 30s-1min。注意：塑料研磨棒

可以重复使用，用 70%的酒精彻底冲洗干净，用纸巾擦干。

4.盖上盖子，台式离心机最高转速离心 1min，弃掉离心管柱。收集管中的上清就是提取的总蛋白，将其转移到一个新管

中。管底的白色沉淀是穿过柱子的蛋白研磨粉，弃掉即可。

储存条件

常温。

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2）本产品仅作科研用途！