价格:460
货号MluI
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产品详情
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产品信息
产品名称 |
产品编号 |
规格 |
储存 |
MluI |
HRF0412 |
100 rxns |
-20℃ |
产品描述
本公司生产的MluI酶是通过基因重组表达获得的快速限制性内切酶,适用于质粒 DNA、PCR 产物或基因组 DNA 等的快速酶切。
酶切位点
5' |
A |
↓ |
C |
G |
C |
G |
|
T |
3' |
3' |
T |
|
G |
C |
G |
C |
↑ |
A |
5' |
注意事项
1)可在5~15 min 内完成反应;
2)最适反应温度为37℃;
3)对于被 CpG 甲基化的 DNA,剪切可能受阻
4)对于被 EcoKI 甲基化的 DNA,剪切可能受阻
5)对于被 EcoBI 甲基化的 DNA,剪切可能受阻
6)失活条件为80℃温浴20min
7)3h温浴未表现星号活性,更长时间酶切可能出现星号活性
8)本产品仅作科研用途!
运输和保存方法
冰袋运输。-20℃保存,有效期12个月。
产品组成
组分 |
规格 |
MluI |
100μL |
10×Reaction buffer |
1mL |
10×Color Reaction buffer |
1mL |
使用方法
1.DNA快速酶切过程
1)在冰上配制以下反应体系:
组分 |
质粒DNA |
基因组DNA |
ddH2O |
15μL |
30μL |
10×Reaction buffer或 10×Color Reaction buffer |
2μL |
5μL |
底物DNA |
2μL(up to 1μg) |
10μL(5μg) |
MluI |
1μL |
5μL |
Total |
20μL |
50μL |
3)轻柔吸打或轻弹管壁以混匀(切勿涡旋),然后瞬时离心以收集挂壁液滴;
4)37℃温育15 min(质粒),或 30~60 min(基因组 DNA);
5)80℃温育 20 min 即可使酶失活,停止反应(可选);
6)如果使用 10×Color Reaction buffer进行酶切反应,得到的产物可以直接进行上样电泳。
2.双酶切或多酶切
1)每种快速内切酶的用量为1μl,并根据需要适当扩大反应体系;
2)所有快速内切酶的体积总和不得超过总反应体系的1/10;
3)如果所用的几种快速内切酶的最适反应温度不同,应先以最适温度低的酶开始酶切,再添加最适温度较高的酶,在其最适反应温度下进行酶切反应。
3.适用于质粒的扩大反应体系
DNA |
1μg |
2μg |
3μg |
4μg |
5μg |
MluI |
1μL |
2μL |
3μL |
4μL |
5μL |
10×Reaction buffer或 10×Color Reaction buffer |
2μL |
2μL |
3μL |
4μL |
5μL |
total |
20μL |
20μL |
30μL |
40μL |
50μL |
注:如果总反应体系大于 20 μl,应适当增加温育时间,尽量使用水浴、金属浴或沙浴。