价格:288
货号2×HRbio™ Hi-Fi Plus PCR Master Mix 高保真酶预混液
产品详情
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产品信息
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产品名称 |
产品编号 |
规格 |
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2×HRbio™ Hi-Fi Plus PCR Master Mix 高保真酶预混液 |
HRF0096 |
100 μL |
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HRF0097 |
1 mL |
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HRF0098 |
5×1 mL |
产品描述
本产品包含 HRbio™ Hi-Fi Plus DNA Polymerase、dNTPs 和优化的反应缓冲液，浓度为2×。 使用时只需加入模板、引物，并补足水至 Mix 终浓度为 1×即可。HRbio™ Hi-Fi Plus DNA Polymerase为多种采用最先进基因工程改造而来的超保真酶添加延伸因子混合而成，极大的提高了扩增长度、扩增速度、保真性和产量。Hi-Fi Plus Mix 是长片段超保真快速扩增的首选产品。本制品含红色示踪染料，不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳；也可经过纯化处理，以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。PCR 产物为平末端，不需要加 A 头，可直接用荷瑞 pTOPO Blunt 平末端系列载体（货号 HRF0161、HRF0171）克隆。
2×HRbio™ Hi-Fi Plus PCR Master Mix 具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点，反应体系只需加入引物 和模板即可，并可以通过两步法的程序进行扩增，简化了实验步骤，节省了时间。
产品特点
1.扩增速度快：延伸速度可以达到2kb/min。
2.优异保真性：保真度是taq的54倍以上。一般随机挑一个菌测序便是正确无突变菌落。
3.产量更高：带给你更亮的目的条带。
4.操作便捷：具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点，反应体系只需加入引物和模板即可，简化了实验步骤，节省了时间。
产品应用
基因克隆；复杂 DNA 模板扩增；高通量建库。
运输和保存方法
冰袋运输。-20℃保存，有效期2年。
注意事项
1）解冻后 Master Mix 可能出现晶体沉淀,使用前务必涡旋振荡混匀至沉淀消失，不影响试剂性能。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作；
3）本产品仅作科研用途！
推荐PCR反应体系（冰上配制）
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组分 |
体积（μL） |
终浓度 |
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ddH2O |
to 50 μL |
- |
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2×HRbio™ Hi-Fi Plus PCR Master Mix |
28.5 μL |
1× |
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DNA 模板 |
适量 |
- |
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Primer 正向 (10 μM) |
2.5 μL |
0.5 μM |
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Primer 反向 (10 μM) |
2.5 μL |
0.5 μM |
参考模板用量（50 μl 反应体系）：
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模板种类 |
DNA模板用量 |
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人类基因组 DNA |
50 ng-150 ng |
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细菌基因组DNA |
10-100 ng |
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质粒 |
0.1-10 ng |
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cDNA |
1-5 μL From RT reaction |
建议PCR扩增程序：
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循环步骤 |
温度 |
时间 |
循环数 |
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预变性 |
94℃ |
2 min |
1 |
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变性 |
98℃ |
10 sec |
30-35 |
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退火 |
Tm |
30 sec |
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延伸 |
68℃ |
30 sec/kb |
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终延伸 |
68℃ |
7 min |
1 |
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4℃ |
Hold |
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注意事项：
1.预变性温度和时间： 推荐温度： 94℃ ，时间： 2 min ，高 GC 含量模板 5- 10 min。
2.退火温度和时间： 可根据引物退火的温度。推荐退火时间 设置为 30 sec，可以在 10-30 sec 内调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。
3.延伸温度和时间： 推荐温度：68℃ 。时间： 30 sec/kb ，复杂模板根据实际情况可延长至 60sec/kb。
4.扩增产物： 请将 PCR 扩增产物放置于-20℃ 保存，防止该酶降解扩增产物。扩增产物为平末端。