价格:300
货号T4 DNA Ligase（5U/μL）
产品详情
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产品信息
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产品名称 |
产品编号 |
规格 |
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T4 DNA Ligase（5U/μL） |
HRF0202 |
100 U |
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HRF0203 |
300 U |
产品说明
T4 DNA Ligase（5U/μL）是从表达T4 DNA Ligase 基因的大肠杆菌经诱导表后分离纯化而来的。它催化相邻DNA链的的5' -磷酸末端和3'-羟基末端以磷酸二酯键结合反应。该酶催化平滑末端或粘性末端DNA的连接，修复双链DNA、RNA、DNA/RNA 杂交中的单链中的单链切口。
适用范围
1.DNA片段和载体DNA快速连接:
2.限制酶切片段的克隆;
3.将DNA片段与Linker或Adaptor连接。
缓冲液
酶贮存缓冲液：20mM Tris-HCl (pH7.5)，0.1 mM EDTA，1mM DTT，50 mM KCl，50% glycerol。
10×Ligation Buffer：400 mM Tris-HCl，100 mM MgCl2，100 mM DTT，5 mM ATP (pH7.8)，其他成分。
建议连接反应体系：（以10 μL反应体系为例）
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标准反应管 |
阳性对照管 |
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Vector |
μL |
μL |
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PCR产物 |
n μLl** |
/ |
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对照插入DNA片段 |
/ |
1 μL |
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T4 DNA连接酬(5U/ul) |
2-5 U |
2-5 U |
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10×Ligation Buffer |
1 μL |
1 μL |
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加去离子水至终体积 |
10 μL |
10 μL |
反应循环的设置
粘端连接: 22℃反应10分钟(可根据需要延长到1小时)
平端连接: 22℃反应2小时或16°C过夜。
运输和保存方法
冰袋运输。-20℃ (保存6个月)。
注意事项
1）为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
2）本产品仅作科研用途！