D-Luciferin, Sodium Salt D-荧光素钠盐

D-Luciferin, Sodium Salt D-荧光素钠盐

价格:907

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产品信息

 

产品名称

产品编号

规格

储存

D-Luciferin, Sodium Salt D-荧光素钠盐

HRA1231

100 mg

-20℃干燥避光保存

HRA1232

500 mg

-20℃干燥避光保存

HRA1233

1 g

-20℃干燥避光保存

HRA1234

5 g

-20℃干燥避光保存

HRA1235

10 g

-20℃干燥避光保存

 

产品描述

 

D-荧光素(D-Luciferin)是荧光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍应用于整个生物技术领域,尤其是体内活体成像技术。其作用机制是在ATP和荧光素酶的作用下,荧光素(底物)能够被氧化发光(见下图)。当荧光素过量时,产生的光量子数与荧光素酶的浓度呈正相关性。将携带荧光素酶编码基因(Luc)的质粒转染入细胞后,导入研究动物如大、小鼠体内,之后注入荧光素,通过生物发光成像技术(BLI)来检测光强度变化,从而实时监测疾病发展状态或药物的治疗功效等。也可以利用ATP对此反应体系的影响,根据生物发光强度的变化来指示能量或生命体征。

 

 

D-荧光素也常用于体外研究,包括荧光素酶和ATP水平分析;报告基因分析;高通量测序和各种污染检测。目前有三种产品形式:D-荧光素(游离酸),D-荧光素盐(钠盐和钾盐)。主要差别在于溶解特性:前者的水溶性以及缓冲体系的溶解性都较弱,除非溶于弱碱如低浓度NaOH和KOH溶液,可溶于甲醇和DMSO;后者易溶于水或缓冲液中,使用方便,溶剂无毒性,特别适合体内实验。配成溶液后的这三种产品,在绝大多数的应用上都没有实质性的差别。


产品性质

 

中文别名(Chinese synonym)

D-荧光素钠盐;

英文别名(English synonym)

(S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid sodium salt; D-Luciferin firefly, sodium salt monohydrate;

CAS号(CAS NO.)

103404-75-7

分子式(Formula)

NaC11H7N2O3S2·H2O

分子量(Molecular weight)

302.30 g/mol

外观(Appearance)

淡黄色粉末

溶解性(Solubility)

易溶于水(100 mg/mL)

纯度(Purity)(HPLC)

> 99%

 

运输和保存

冰袋运输;-20℃干燥避光保存;有效期一年。


使用方法

 

1. 体外生物发光检测

1)用无菌蒸馏水溶解D-荧光素钠盐,配制成30 mg/mL的储存液 (100-200×) ,混匀。立即使用,或分装于-20℃避光保存,避免反复冻融。

2)用预热好的组织培养基将储存液稀释至0.15-0.3 mg/mL的工作液浓度。

3)去除细胞培养基。

4)待图像分析前,向细胞内添加荧光素工作液,37℃孵育5-10 min,然后进行图像分析。

2. 活体成像分析

1)用无菌的DPBS (w/o Mg2+、Ca2+) 配制15 mg/mL的荧光素的储存液,混匀。

2)用0.2 m滤膜过滤除菌。立即使用,或分装于-20℃避光保存,避免反复冻融。

3)腹腔注射(i.p.),按照150 mg/kg的荧光素/体重浓度进行注射。

4)注射入体内10-15 min(待光信号达到最强稳定平台期)后进行成像分析。

注:建议对每只动物模型都需要建立荧光素酶动力学曲线,从而确定最高信号检测时间和信号平台期。

 

注意事项


1)本品(firefly luciferin)和甲虫荧光素(beetle luciferin)仅仅是不同公司在命名上的差异,都是指化合物(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl)-2-thiazoline-4-carboxylic acid。
2)注射方式、动物类型以及体重等都会影响信号的发射,因此建议每次实验都要做荧光素酶动力学曲线,确定最佳信号平台期和最佳的检测时间。
3)如果要进行ATP的检测,尽量避免外源ATP的污染,如操作时戴手套并使用ATP-free的实验耗材,在进行荧光素的溶解时应使用ATP-free无菌水。
4)本品要进行避光操作和保存。储存液过滤除菌后可分装于-20℃或-80℃冻存。如果有条件,可对储存液充入氮气或氩气(防止氧化),稳定性和保存时间长达1年。
5)在进行D-荧光素钠盐的溶解时,应使用无钙镁离子的DPBS,因钙镁离子可能会抑制荧光素酶的活性,此外镁离子可能会对荧光素的氧化造成影响,从而影响检测。
6)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

7)本产品仅作科研用途!

 

 

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