• 说明书丨HRD0321-Human DiI-Acetylated Low Density Lipoprotein （Human DiI-Ac-LDL） DiI标记人源乙酰化低密度脂蛋白（红色荧光）.pdf

产品信息

产品描述

LDL是由极低密度脂蛋白（VLDL）转变而来，主要功能是把胆固醇运输到全身各处细胞，运输到肝脏合成胆酸，其可用于研究受体介导的内吞作用过程，尤其是在动脉粥样硬化等疾病中，其血浆来源的LDL可用于研究LDL在功能和代谢中的氧化作用。

乙酰化的LDL是修饰LDL中的一类，LDL含有未修饰的载脂蛋白，可以用来研究正常胆固醇的转运和内吞作用。当LDL载脂蛋白的赖氨酸残基被乙酰化修饰后，LDL复合物不再与LDL受体结合，但是，修饰型LDL更容易与内皮细胞和小胶质神经细胞的“scavenger”受体结合。因此，Ac-LDL可用来研究上述细胞的功能。

人源乙酰化低密度脂蛋白（Human Acetylated Low Density Lipoprotein, Human Ac-LDL），来自健康人源血浆LDL，Hepatitis C，HIV-I和HIV-II抗体检测均为阴性。

本品为红色荧光标记的乙酰化人源低密度脂蛋白（Human DiI-Ac-LDL），是标记荧光探针DiI（1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'- tetramethyl-indocarbocyanine perchlorate）的Ac-LDL。当DiI-Ac-LDL标记细胞后，在溶酶体酶的作用下，脂蛋白被降解，而DiI在细胞内膜聚集，从而可以用来检测修饰型LDL的吸收情况。可以用来标记血管内皮细胞、巨噬细胞和内皮祖细胞（EPC），可用来鉴定并分选这些细胞，以及用来研究不同细胞系对修饰化LDL的内吞作用。我司提供的DiI-Ac-LDL，每个批次均经过牛大动脉内皮细胞和小鼠巨噬细胞的标记检测来评估产品的标记特异性，从而保证结果的一致性。

Human DiI-Ac-LDL为无菌包装，可以直接稀释使用。除提供DiI-Ac-LDL，我们还提供不带标记的Ac-LDL，Ox-LDL（氧化修饰）以及不经修饰的LDL等。

产品性质

运输与保存方法

冰袋运输。

4C无菌避光，收到货后可稳定保存6周。千万不可冻存！使用时一定要无菌操作！

注意事项

1）本品的稀释工作液极不稳定，建议即配即用；

2）长期贮存可能会有沉淀析出，属于正常现象，低速离心2 min去除沉淀即可使用；

3）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

4）本产品仅作科研用途！

操作步骤

1）无菌条件下，将Human DiI-Ac-LDL用细胞培养基稀释至20-50g/ml。

2）加入活细胞内，37℃培养4小时。

3）孵育结束，吸去含有Human DiI-Ac-LDL的培养基，并用无探针的培养基洗几次。

4）根据实验需求用荧光显微镜或流式细胞仪检测。

① 荧光显微镜观察

采用标准的罗丹明激发：发射滤光片（或建议使用波长为：Ex/Em=549nm/565nm）；若需要请使用含3%甲醛的PBS进行固定，切勿使用甲醇或丙酮固定，因Dil易溶于有机溶剂。【注】：需设阳性细胞以做对照。

② 细胞分选（流式细胞术）

胰蛋白酶处理细胞或者加入EDTA制成单细胞悬液，选用合适的已标记纯化细胞用作阴性和阳性对照，从而进行流式分选设门（gate）。（建议使用波长为Ex:514/549nm; Em: 565nm）。