产品信息

产品描述

      生物配体快速偶联试剂盒中磁珠表面为特殊基团修饰，能够与带有伯胺基团的蛋白和其他分子形成稳定的化学键，用于亲和纯化抗体、抗原和其他生物分子。与传统的羧基、氨基磁珠相比，无需活化，只需简单地将含伯氨基的生物配体溶解在试剂盒自带的Coupling buffer或PBS中，室温下将生物配体与磁珠混合1~2 h便可将生物配体共价偶联到磁珠上，具有操作简单、偶联条件温和、生物配体偶联快速高效等优点。磁珠偶联过程必须在不含任何氨基的缓冲溶剂中进行。人工操作时，使用磁性分离架实现磁珠与溶剂分离。也可采用自动化设备操作，自动化操作适合用于多样品的筛选。

使用说明

1．试剂盒组分

2. 磁珠基本信息

注：结合能力与生物配体本身特性有关，此处仅做参考值。

3. 与不同分子量蛋白结合能力

注：结合量会受蛋白质活性伯胺基团和仲胺基团的数量影响。

磁珠与生物配体的偶联方法

以下操作过程以取磁珠样品500μL，采用2mL EP管为例介绍。用户可根据自身需求按比例调整：

1. 配体溶液配制：

取适量待偶联配体用Coupling Buffer溶解，配成浓度为0.5-5.0mg/mL的配体溶液。已经保存于buffer 中的配体，需要通过透析或者脱盐的方法彻底除去原有buffer里含伯胺基的物质，然后再用Coupling Buffer配成浓度为0.5-5.0mg/mL的配体溶液，将配制好的配体溶液于4ºC保存备用。

注：

(1)为了达到更好的性能，当配体浓度≥2 mg/mL 时，此时偶联效率会更高，不过需根据成本和使用要求综合考虑；

(2)配体溶液中不能含有带伯氨基的成分，比如Tris，甘氨酸，明胶，BSA 等；

2. 磁珠清洗：混匀磁珠后，取500 μL磁珠到2mL EP管中，磁性分离去除上清液，用1mL WashingBuffer洗涤2次，磁性分离去上清；

3. 生物配体偶联：向装有磁珠的EP管中加入500 μL配体溶液（合适用量及浓度需要根据具体实验进行优化），轻柔地混匀， 25℃偶联1~2 h，或放置4℃偶联过夜，偶联期间保持磁珠的悬浮状态（可利用垂直混合仪进行颠倒混匀）；

4. 磁珠封闭： 将EP管置于磁力架上磁性分离去除上清液，加入1mL Blocking Buffer重悬磁珠，25℃封闭2 h，或放置4℃封闭过夜，封闭期间保持磁珠的悬浮状态（可利用垂直混合仪进行颠倒混匀）；

5. 保存：将EP管置于磁力架上磁性分离去除上清液，用1mL Storage Buffer洗涤3次后，重新悬浮于500 μL Storage Buffer中，最终偶联配体后的磁珠浓度为10mg/mL，最后保存于4℃。可根据需要来确定保存溶液的加入量，以调整偶联配体磁珠的浓度，必要时可以在保存溶液中加入0.05%叠氮化钠或0.1% proclin-300抑制细菌生长。

储存条件

在2-8℃稳定保存，保质期一年。

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2）本产品仅作科研用途！