价格:980
货号木质素(Lignin)含量试剂盒
产品详情
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产品信息
产品名称 |
测定方法 |
产品编号 |
规格 |
木质素(Lignin)含量试剂盒 |
微量法 |
HRK2836 |
100管/96样 |
正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
木质素是构成植物细胞壁的成分之一,是由聚合的芳香醇构成的一类物质,存在于木质组织中,主要作用是通过形成交织网来硬化细胞壁。木质素主要位于纤维素纤维之间,起抗压作用。
测定原理
木质素中的酚羟基发生乙酰化后在280nm处有特征吸收峰,280nm的吸光值高低与木质素含量正相关。
需自备的仪器和用品
天平、40目筛,玻璃试管、烧杯、离心机,恒温水浴锅、封口膜、烘箱、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板(UV板)、高氯酸,浓硫酸。
试剂组成和配制
试剂一:液体50mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:液体50mL×1瓶,4℃保存。
试剂三:液体100mL×1瓶,4℃保存。
样品处理
样品80℃烘干至恒重,粉碎,过40目筛,称取约2mg(记为W)于10mL玻璃试管中(务必用玻璃试管,不可用Ep管)
测定操作表
|
空白管 |
测定管 |
样本(mg) |
|
2 |
试剂一(μL) |
500 |
500 |
高氯酸(μL) |
20 |
20 |
于10mL玻璃试管中,用封口膜密封,充分混匀,80℃水浴40min,每隔10min震荡一次,然后自然冷却 |
||
试剂二(μL) |
500 |
500 |
充分混匀 |
||
上清(μL) |
20 |
20 |
试剂三(μL) |
980(参照注意事项四) |
980(参照注意事项四) |
取200μL于微量石英比色皿/96孔板,测定280nm处吸光值A。分别记为A空白管和A测定管,ΔA=A测定管-A空白管 |
计算公式
标准曲线:y = 0.0347x+0.0068,R2=0.9889
Lignin(mg/g干重)= (ΔA-0.0068)÷0.0347×V反总×10-3÷W×T=0.0294×(ΔA-0.0068) ÷0.002×50
V反总:反应总体积:1.02mL;W:样本质量,g;T:稀释倍数
注意事项
1.试剂一有毒性,请操作时做好防护措施,加热前必须用封口膜密封,以防气体溢出。
2.加热过程中有剧烈反应,震荡时轻摇,以免压力过大喷出造成人身伤害。
3.试剂三具有强刺激性,建议操作过程全部在通风橱子操作。
4.取上清加试剂三步骤根据自己样品乙酰化程度,试剂三的用量可调整,保证吸光值在0.1-0.8之间即可,并在公式中参与计算。
5.本产品仅作科研用途!