土壤脲酶(Solid-Urease,S-UE)测定试剂盒

土壤脲酶(Solid-Urease,S-UE)测定试剂盒

价格:380

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产品信息

 

产品名称

测定方法

产品编号

规格

土壤脲酶(Solid-Urease,S-UE)测定试剂盒

分光光度法

HRK19002

50管/24样

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

 

测定意义

 

S-UE能够水解尿素,产生氨和碳酸。土壤脲酶活性与土壤的微生物数量、有机物质含量、全氮和速效氮含量呈正相关。土壤脲酶活性反应了土壤的氮素状况。

 

测定原理

 

利用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的NH3-N。

 

需自备的仪器和用品

 

可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、甲苯(不允许快递)。

 

试剂的组成和配制

 

试剂一:甲苯10mL×1瓶,4℃保存;(自备)

试剂二:粉剂×1瓶,临用前加入20mL蒸馏水,充分溶解待用,4℃保存;用不完的试剂4℃保存;

试剂三:液体65mL×1瓶,4℃保存;

试剂四A液:液体1mL×1瓶,4℃保存;试剂四B液:液体4mL×1瓶,4℃保存;临用前将A液倒入B液中混合,待用;用不完的试剂4℃保存一周;

试剂五:液体5mL×1瓶,4℃保存;

 

样品处理

 

新鲜土样自然风干或37度烘箱风干,过30~50目筛。

 

测定步骤

 

1 、培养

 

测定管

对照管

风干土样(g)

0.25

0.25

试剂一(μL)

125

125

振荡混匀,室温放置15min

试剂二(μL)

625

 

蒸馏水(μL)

 

625

试剂三(μL)

1250

1250

混匀,放入37℃水浴培养24h后,10000g 25℃离心10min,取上清液。

2、将培养结束的上清液稀释10倍(取0.1mL上清液,加入0.9mL蒸馏水)。

3、测氨量

 

测定管

对照管

稀释后的上清液(μL)

400

400

试剂四(μL)

80

80

试剂五(μL)

60

60

充分混匀,室温放置20min

蒸馏水(μL)

460

460

混匀, 578nm处蒸馏水调零,测A值,ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。

 

脲酶活力计算

 

标准条件下测定的回归方程为y = 0.0915x +0.0373;x为标准品浓度(μg/mL),y为吸光值。

单位的定义:每天每g土样中产生1μg NH3-N定义为一个酶活力单位。

脲酶活力(μg/d /g 土样)=(ΔA-0.0373) ÷0.0915×10×V反总÷W÷T =874×(ΔA -0.0373)

10:稀释倍数;T:反应时间,1d; V反总:反应体系总体积:2mL;W:样本质量,0.25g。

注意事项

本产品仅作科研用途!

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