土壤过氧化物酶(Solid- Peroxidase,S-POD)试剂盒

土壤过氧化物酶(Solid- Peroxidase,S-POD)试剂盒

价格:850

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产品信息

 

产品名称

测定方法

产品编号

规格

土壤过氧化物酶(S-POD)试剂盒

微量法

HRK19028

100管/96样

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

 

测定意义

                  

s-POD主要来源于土壤微生物,能够氧化土壤有机物质产生过氧化物,在腐殖质的形成过程中具有重要作用。

 

测定原理

 

s-POD催化有机物质氧化成醌,后者在430nm有特征光吸收。

 

自备用品

 

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、乙醚50mL(不允许快递)和蒸馏水。

 

试剂组成和配制

 

试剂一:粉剂×2瓶,4℃保存;临用前取一瓶,加入6mL蒸馏水充分溶解后待用;用不完的试剂4℃保存一周。

试剂二:液体2.5mL×1瓶,4℃保存;

试剂三:液体6mL×1瓶,4℃保存; 

试剂四:乙醚50mL×1瓶,4℃保存;(自备) 

 

样品处理

 

新鲜土样自然风干或37度烘箱风干,过30~50目筛。

 

测定步骤

 

分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至430nm,蒸馏水调零。

加样表

试剂名称

测定管

风干土样(g)

0.02

试剂一(μL)

100

试剂二(μL)

20

振荡混匀,30℃恒温培养1 h

试剂三(μL)

50

试剂四(μL)

430

振荡数次,25℃室温静置30min,吸取200μL上层液于430nm处测定吸光值A

(注意:1、因乙醚粘度小,易掉液,吸取前需先将枪头在上层液里润洗2~3次,再转移测定;2、乙醚易挥发,转移到96孔板后立即测定,最好一个一个测定)。

 

S-POD活力计算

 

a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准条件下测定的回归方程为y = 8.97x -0.003;x为标准品浓度(mg/mL),y为吸光值A。

单位的定义:每天每g土样中产生1mg 紫色没食子素定义为一个酶活力单位。

S-POD活力(mg/d/g 土样)=(A+0.003) ÷8.97×V反总÷W÷T=80×(A+0.003)

T:反应时间,1h=1/24d; V反总:反应体系总体积0.6mL;W:样本质量,0.02g。

b.用96孔板测定的计算公式如下

标准条件下测定的回归方程为y = 4.485x -0.003;x为标准品浓度(mg/mL),y为吸光值A。

单位的定义:每天每g土样中产生1mg 紫色没食子素定义为一个酶活力单位。

S-POD活力(mg/d/g 土样)=(A+0.003) ÷4.485×V反总÷W÷T=160×(A+0.003)

T:反应时间,1h=1/24d; V反总:反应体系总体积0.6mL;W:样本质量,0.02g。

注意事项

本产品仅作科研用途!

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