• 说明书丨HRA1953-GUS染色试剂盒.pdf

产品信息 

产品描述

    GUS(β-Galactosidase)基因是存在于E.coli等一些细菌基因组内的编码β-葡萄糖苷酸酶的一种水解酶，该基因常作为融合标记用于植物转基因分析和调控研究中。GUS受体基因系统有表达E.coli GUS酶的稳定性和在植物内的低活性，绝大多数植物没有检测到葡萄糖苷酸酶的背景活性，以β-葡萄糖苷酸酯类物质为底物，其反应产物可用多种方法检测出来。X-Gluc分子量为521.8，CAS:18656-96-7，是检测大肠杆菌中GUS基因的底物，可快速检测植物中GUS基因融合标记。

GUS染色液染色原理是：在适宜的反应条件下，β-葡萄糖苷酶(GUS)可将X-Gluc水解成蓝色物质，该物质不溶解于转基因的细胞核组织中的靛蓝物质，具有GUS活性的部位或位点呈现蓝色或蓝色斑点，可用肉眼或显微镜观察到。GUS染色液可用于生物化学活性分析、免疫分析以及组织和细胞的组织化学染色，多用于转基因植物的GUS基因表达分析。

产品组分

运输与保存方法

冰袋（wet ice）运输。4℃保存，一年有效。

注意事项

1.配制好的GUS染色液可在2-8℃避光保存长达半个月。

2.X-Gluc工作液应避免反复冻融，以免染色效率的下降。

3.由于组织特异性等原因，蓝色颜色反应可能不完全一致，应注意摸索具体实验条件。

4.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

5.本产品仅作科研用途！

使用说明

1.配制X-Gluc工作液：取X-Gluc缓冲液4mL与100mg 的X-Gluc充分混合或者取适量上述两种物质溶解，使其浓度达到25mg/mL，即为X-Gluc工作液，工作液配制完成后，请及时分装，-20℃避光保存。

2.请按以下比例配制GUS染色液：

3.加入适量上述配制好的GUS染色液，使GUS染色液完全浸没组织。

4.用真空泵抽取小瓶或者多孔板中的气体，抽取时间应大于2min。该步骤是为了抽取植物组织内的气体，使染色液更容易进入组织内。

5.盖紧瓶子或多孔板，37℃孵育6-24小时。随着孵育时间的延长，蓝色逐渐出现，当表达量较高时，GUS活性的部位或位点呈现蓝色或蓝色斑点。

6.用75%乙醇或者无水乙醇浸泡脱色，一般样本浸没于乙醇中1-3h。如有必要可重复该脱色步骤，以便彻底脱色。样本保存于乙醇中，用肉眼或者普通光学显微镜就可观察染色效果。