• 说明书丨HRN0563-尿液基因组DNA快速提取试剂盒.pdf

产品信息 

产品描述

      尿液中DNA来自于尿道中脱落的细胞，用尿液DNA进行分子生物学基础研究和临床诊断有很多特殊的优点：尿液收集物是非介入、无创伤性的；从尿液中提取DNA要比从血液中提取DNA更加简单。本产品就是专门用于从尿液中提取基因组DNA 的产品，提取的DNA可直接用于PCR反应。

产品特点

1..操作简单，整个过程室温操作约 20 分钟，适合大规模样品处理。

2.DNA 产率女性一般为50-200 ng/mL 尿液，男性一般为 3-50 ng/mL 尿液。

3.所提取的 DNA 纯净，可直接用于 PCR、DNA 甲基化鉴定、癌症检测等。

4.安全无毒，本试剂盒对人体无毒，无腐蚀性和刺激性气味。

5.性价比高，质量和国外同类产品相当，但价格更便宜。

产品性质

本试剂盒在室温储存 12 个月不影响使用效果。

运输和保存方法

1.结合液CB或者抑制物去除液IR低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。

2.蛋白酶K保存在即用型甘油缓冲液中，常温运输。收到后，不超过 25℃室温至少保存6个月，4℃保存12个月，－20℃保存2年。

3.避免试剂长时间暴露于空气中发生挥发、氧化、pH 值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。

注意事项

1.所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000 rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。

2.需要自备异丙醇。

3.开始实验前将需要的水浴先预热到70℃备用。

4.本产品仅作科研用途！

操作步骤：（实验前请先阅读注意事项）

提示：第一次使用前请先在漂洗液 WB 中加入指定量无水乙醇，充分混匀，加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!

1.取 5-50 ml 尿液，放入适当大小离心管，3,000 rpm 离心收集细胞沉淀。

2.小心弃上清，加入 200μl 缓冲液 UB 重悬细胞。

3.加入 20μl 蛋白酶 K (20mg/ml)溶液，充分混匀，再加入 200μl 结合液 CB，立刻涡旋振荡充分混匀，在 70℃放置 10 分钟。溶液应变清亮。

4.冷却后加入 100μl 异丙醇，立刻涡旋振荡充分混匀，此时可能会出现絮状沉淀。上述步骤中立刻涡旋或者吹打充分混匀非常重要，混匀不充分严重降低产量，必要时如样品粘稠不易混匀时可以涡旋振荡 15 秒混匀。

5.将上一步混合物（包括可能有的沉淀）加入一个吸附柱 AC 中，（吸附柱放入收集管中）13,000 rpm 离心 30-60 秒，倒掉收集管中的废液。

6.加入 500μl 抑制物去除液 IR，12,000 rpm 离心 30 秒，弃废液。

7.加入 500μl漂洗液WB（请先检查是否已加入无水乙醇!），12,000 rpm 离心30秒，弃掉废液。

8.加入 500μl 漂洗液WB，12,000 rpm 离心 30 秒，弃掉废液。

9.将吸附柱 AC 放回空收集管中，13,000 rpm 离心 2 分钟，尽量除去漂洗液， 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。

10.取出吸附柱 AC，放入一个干净的离心管中，在吸附膜的中间部位加 30μl 洗脱缓冲液 EB（洗脱缓冲液事先在 65-70℃水浴中预热效果更好），室温放置 3-5 分钟，12,000 rpm 离心 1 分钟。将得到的溶液重新加入离心吸附柱中，室温放置 2 分钟，12,000 rpm 离心 1 分钟。

洗脱体积越大，洗脱效率越高，如果需要 DNA 浓度较高，可以适当减少洗脱体积， 但是最小体积不应少于 15μl，体积过小降低 DNA 洗脱效率，减少 DNA 产量。

11.DNA 可以存放在 2-8℃，如果要长时间存放，可以放置在－20℃。