价格:2,350
货号转染试剂 3000

产品详情
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产品信息 :
产品名称 |
产品编号 |
规格 |
转染试剂3000 |
HRX1402 |
1.5mL |
产品描述:
转染试剂3000是一款高性能、高品质的通用型基因转 染试剂,既可用于传送质粒 DNA,又具有较强的 RNA 转染能力。与其它转染试剂相比,具有不受血清影响、毒性低、稳定性好、转染简单易行、重复性好等优点。
应用范围:
转染试剂 3000 转染试剂可适用于众多较难转染细胞株的 DNA/siRNA 转染、瞬时转染及稳定转染。适用于多种贴壁细胞,特别适用于各种较难转细胞如 L929、NIH3T3、MCF-7 和 A549 等,均可得到较高的转染效率,且重复性好。
运输与保存:
常温运输,2-8℃保存一年
注意事项:
本产品仅供科研用途!
自质粒DNA的转染:
以24孔板为例,请参考表1的转染规模调整,步骤如下:
步骤 |
操作 |
1. |
细胞接种: 每孔接种0.5~1.0×105个细胞,细胞培养12~24小时,使转染时细胞密度达到60~70%融合度 |
2. |
质粒稀释: 将0.4µg质粒稀释于Opti-MEM培养基中,终体积10µL |
3. |
复合物制备: 按比例取适量转染试剂2000稀释于Opti-MEM培养基中,终体积10µL,室温孵育5分钟后与质粒稀释液混匀 |
4. |
室温静置20分钟 |
5. |
每孔20µL 复合物加入细胞培养板中,混匀,37℃培养18~48小时后检测基因表达,无需更换培养基 |
siRNA 的转染:
转染步骤与 DNA 相同,请参考表 1 的转染规模进行调整,所有数量和体积均是按孔计算。转染高密度细胞可获得高转染效率、高表达水平和低细胞毒性。
质粒DNA的转染优化:
可通过改变细胞密度、 DNA/siRNA 浓度以及转染试剂 3000 浓度对转染进行优化。保证细胞融合度在 60%以上,转染试剂 3000(µL): DNA (µg)可以在 1:1 和 5:1 之间调整;转染试剂3000(µL):siRNA(pmol)可以在 0.02:1 和 0.15:1 之间调整。
表1. 不同培养板所需转染试剂和DNA的用量
培养板 |
单孔面积 |
接种培养基 |
Opti-MEM稀释后终体积 |
DNA转染 |
siRNA 转染
|
||
试剂用量 |
DNA |
试剂用量 |
siRNA |
||||
96孔板 |
0.3cm2 |
200µL |
10µL |
0.4µL |
0.2µg |
0.5µL |
7.5pmol |
24孔板 |
2.0cm2 |
500µL |
20µL |
0.8µL |
0.4µg |
1.0µL |
15pmol |
12孔板 |
4.0cm2 |
1mL |
40µL |
2µL |
1µg |
2.0µL |
30pmol |
6孔板 |
10.0cm2 |
2mL |
100µL |
4µL |
2µg |
4.0µL |
60pmol |
60mm |
20.0cm2 |
5mL |
0.2mL |
8µL |
4µg |
10µL |
100pmol |
10cm |
60.0cm2 |
15mL |
0.6mL |
24µL |
12µg |
30µL |
300pmol |