ExNuclease 全能核酸酶

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产品详情

本产品性能突出，不逊于Merck公司的全能核酸酶，可提供小样测试。

产品信息

产品名称	产品编号	规格	储存
ExNuclease 全能核酸酶	HRX0111	25 KU	-20℃
	HRX0112	50 KU	-20℃
	HRX0113	100 KU	-20℃

产品描述

ExNuclease（全能核酸酶），又称非限制性核酸内切酶、广谱核酸酶；是一种来源于Serratia Marcescen的非特异性核酸内切酶，可在链内任意核苷酸间进行切割，将核酸完全消化成2-5个碱基长度的5'-单磷酸寡核苷酸，能够在非常广泛的条件下（6 M Urea，0.1 M Guanidine HCl，0.4% Triton X-100，0.1% SDS，1 mM EDTA，1 mM PMSF）降解各种形式的（双链，单链，线状，环状，天然或变性）DNA和RNA，广泛用于去除生物制品中的核酸。

本品经基因工程改造在Escherichia coli (E. coli)中表达纯化，纯度＞95%，可用于科学研究中降低细胞上清和细胞裂解液的粘度，提高蛋白纯化效率及功能研究，并且可以有效防止细胞治疗和疫苗研究中人外周血单核细胞（PBMC）的结团。

本品以无菌液体酶的形式提供，储存于缓冲液（20 mM Tris-HCL pH 8.0，2 mM MgCl₂，20 mM NaCl，50%甘油）中，无色透明液体。

产品性质

指标名称	指标参数
来源	E. coli
分子量	26.5 kDa
等电点	6.85
纯度	≥ 96%（SDS-PAGE）
酶活	≥ 300 U/μL
比活	≥ 1.5×10⁶U/mg蛋白
最适pH	8.0
最适温度	37℃
辅助因子	1-10 mM Mg²⁺
蛋白酶活性	Undetected
储存缓冲液	20 mM Tris-HCl pH8.0，2 mM MgCl₂，20 mM NaCl，50%甘油
活性单位定义	在37℃，pH 8.0反应条件下，2.625 mL反应体系中，在30 min内使△A₂₆₀吸收值变化1.0（相当于完全消化37 μg鲑鱼精DNA成为寡核苷酸）所用的酶量定义为一个活性单位（U）。

运输和保存方法

冰袋运输。-20℃保存，有效期1年。若是打开包装后并4℃放置超过一周，建议过滤除菌防止微生物污染。

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2）本产品仅作科研用途！

推荐使用条件

条件参数	最佳条件	有效条件
Mg²⁺	1-2 mM	1-10 mM
pH	8-9	6-10
温度	37℃	0-42℃
DTT	0-100 mM	>0 mM
巯基乙醇	0-100 mM	>0 mM
单价阳离子	0-20 mM	0-150 mM
磷酸根离子	0-10 mM	0-100 mM

推荐使用量和处理时间

ExNuclease用量（终浓度）	处理时间
0.25 U/mL	> 1 h
2.5 U/mL	15 min
25 U/mL	2 min

使用方法

1、样本准备

贴壁细胞：去除培养基，用PBS多次清洗细胞，去掉上清。

悬浮细胞：离心收集细胞，用PBS清洗细胞，6,500 rpm 离心15 min，收集沉淀。

大肠杆菌：离心收集菌体，用PBS清洗1次，8,500 rpm 离心5 min，收集沉淀。

2、样品处理

将收集到的细胞沉淀按照质量（g）与体积（mL）比1：(10~20) 的比例进行裂解处理，也可通过在冰上或室温通过机械或化学方法裂解细胞（1 g细胞约为10⁹个）。

3、酶的添加

按照250 Units消化1 g细胞沉淀的比例添加ExNuclease，也可以跟据上表中的推荐使用量自行选定添加方案，在一定范围内增加酶量，消化所需时间相应减少。

4、上清获取

以12,000 rpm的转速离心30min获得细胞裂解液上清，再进行后续相关实验。