• 血清铁-HRK1817.pdf

产品信息

正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义

血清铁是指血液中转铁蛋白所结合的铁，该指标常用于鉴别缺铁性与非缺铁性贫血。

测定原理

亚硫酸钠还原血清Fe³⁺生成成Fe²⁺，Fe²⁺进一步与2, 2’- 联吡啶显色，在520nm处有吸收峰，测定该波长光吸收值即可计算血清铁含量。

自备仪器和用品

可见分光光度计、离心机、可调式移液枪、1mL玻璃比色皿、冰醋酸、氯仿和蒸馏水。

试剂组成和配置

试剂一：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前配制，加入20 mL蒸馏水充分溶解。

试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前配制，加入625μL冰醋酸，加入20 mL蒸馏水充分溶解。

标准液：液体1mL×1支（EP管），10 μmol/L Fe³⁺标准液，4℃保存。

测定

1.分光光度计预热30 min，调节波长到520 nm，蒸馏水调零。

2.标准液解冻：提前取出标准液，置于室温下充分解冻后混匀。

3.空白管：取EP管，依次加入400 μL蒸馏水，400 μL试剂一，400 μL试剂二，混匀后盖紧，置于沸水浴5min，自来水冷却。加入200 μL氯仿（自备），充分震荡混匀；室温10000rpm，离心10min，小心吸取上层液700 μL，加入1mL玻璃比色皿，于520 nm测定吸光度，记为A空白管。

4.标准管：取EP管，依次加入400 μL标准液，400 μL试剂一，400 μL试剂二，混匀后盖紧，置于沸水浴5min，自来水冷却。加入200 μL氯仿，充分震荡混匀；室温10000rpm，离心10min，小心吸取上层液700 μL，加入1mL玻璃比色皿，于520 nm测定吸光度，记为A标准管。

5.测定管：取EP管，依次加入400 μL血清，400 μL试剂一，400 μL试剂二，混匀后盖紧，置于沸水浴5min，自来水冷却。加入200 μL氯仿，充分震荡混匀；室温10000rpm，离心10min，小心吸取上层液700 μL，加入1mL玻璃比色皿，于520 nm测定吸光度，记为A测定管。

注意：空白管和标准管只需测定一次。

血清铁浓度计算公式

血清铁含量(μmol /dL)=[C标准液×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)]×V总= (A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)

C标准液：10 μmol/L Fe³⁺标准液；V总：标准液总体积1mL；1 dL=0.1 L。

注意事项

1、血清铁含量少，所用器皿（EP管）需要注意，避免被铁污染。

2、试剂一和试剂二溶液不稳定，需现配现用，新配制的试剂当天使用完毕。

3、最低检出限为1μmol/L。

4.本产品仅作科研用途！