• Minute™ 角质化组织总蛋白提取试剂盒 HD-021_CN.pdf

产品信息

产品描述

      动物角质化组织中（包括但不仅限于毛发，指甲，角，羊毛）蛋白质含量占80% 。这些组织中含有很多分子量10-135KD不同类型的α-角蛋白。蛋白质大多数分子量为10-65KD。传统方法从角质化组织中提取蛋白质，其缓冲液中通常含有高浓度的尿素，硫脲，盐酸胍等强变性剂，虽然这些变性剂是比较有效的，但是由于缓冲液与组织比值过大，提取出的蛋白质浓度通常很低，进一步分析前还需浓缩，高浓度变性剂很可能干扰下游实验。HD-021试剂盒无需使用上面提到的强变性剂，可有效的提取动物角化组织中的蛋白质，提取出的蛋白质无需浓缩，可直接用于SDS-PAGE。缓冲液中含有0.5%SDS和其他化学成分。蛋白得率可达1-2mg/ml。

应用

      提取的蛋白质样品可以应用于SDS-PAGE, immunoblottings，ELISA及其他应用。

使用说明

以下操作步骤是从 4-5mg 动物毛发或者从 8-10mg 指甲和角/样品中提取。如果起始量较小，需调整相应裂解液的用量比例。

1.蛋白提取前，将角化组织切成小片（1-2mm）

2.将组织放入 1.5 或 2.0ml 离心管中，加入 400ul Buffer A ，然后加入 20ul 2-巯基乙醇到管中

3.用吸头将组织混匀，确保组织被润湿，缓冲液可以整个覆盖组织。盖上盖子，55℃，水浴孵育 24 小时。

4.孵育后，加入 40ul Buffer B 到管中，涡旋震荡几次混匀后倒入离心管柱套管中。组织可以用200ul 吸头吸到离心管柱中。

5.台式离心机最高转速离心 2-3 分钟，弃掉离心管柱，将接收管中的上清液转入新的离心管中保存即可。

蛋白浓度测定可以通过 Bradford 法或使用与还原剂兼容的商业试剂盒测定

储存条件

储存于15-30℃。

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2）本产品仅作科研用途！