土壤蔗糖酶(Solid-Sucrase, S-SC)试剂盒

土壤蔗糖酶(Solid-Sucrase, S-SC)试剂盒

价格:450

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产品信息

 

产品名称

测定方法

产品编号

规格

土壤蔗糖酶(Solid-Sucrase, S-SC)试剂盒

分光光度法

HRK19018

50管/24样

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

 

测定意义

 

S-SC能够水解蔗糖变成相应的单糖而被机体吸收,其酶促作用产物与土壤中有机质、氮、磷含量,微生物数量及土壤呼吸强度密切关,是评价土壤肥力的重要指标。

 

测定原理

 

S-SC催化蔗糖降解产生还原糖,进一步与3,5-二硝基水杨酸反应,生成棕红色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范围内510nm光吸收增加速率与S-SC活性成正比。

 

自备用品

 

可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。

 

试剂组成和配制                                                                                                                                                                                                                                                              

试剂一:甲苯5mL×1瓶,4℃保存;(自备)

试剂二:液体15mL×1瓶,4℃保存;

试剂三:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前每瓶加入40mL蒸馏水充分溶解备用;用不完的试剂4℃保存;

试剂四:液体30mL×1瓶,4℃保存。

 

样品处理

 

新鲜土样自然风干或37度烘箱风干,过30~50目筛。

 

测定步骤和加样表

 

试剂名称

测定管

对照管

风干土样(g)

0.1

0.1

试剂一(μL)

15

15

振荡混匀,使土样全部湿润,37℃水浴15min

试剂二(μL)

250

250

试剂三(μL)

750

 

蒸馏水(μL)

 

750

充分混匀,放入37℃水浴培养24小时,10000 g,4℃,离心5min,取上清液

上清液(μL)     

200

200

试剂四(μL)

500

500

充分混匀,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失),流水冷却后充分混匀,蒸馏水稀释10倍后(可以吸取100μL,加入900μL蒸馏水稀释;如果吸光度大于4,可以适当加大稀释倍数),510nm处蒸馏水调零,读吸光值A。计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管需设一个对照管。

 

S-SC活性计算

 

标准条件下测定的回归方程为y = 4.9x -0.062;x为标准品浓度(mg/mL),y为吸光值。

单位的定义:每天每g土样中产生1mg 还原糖定义为一个S-SC活力单位。

S-SC活力(mg/d /g 土样)=( ΔA+0.062) ÷4.9×10×V反总÷W÷T =20.7×(ΔA+0.062)

10:稀释倍数;T:反应时间,1d; V反总:反应体系总体积:1.015mL;W:样本质量,0.1g。

注意事项

本产品仅作科研用途!

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